新規コレクチンを用いた細胞内O-GlcNAc糖鎖の生理的役割の解明

使用新型集合素阐明细胞内 O-GlcNAc 糖链的生理作用

• 批准号: 12033208
• 负责人: 若宮 伸隆
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12033208/
• 关键词: コレクチン; レクチン; ウイルス; 補体

O-GlcNAc糖鎖は、蛋白のセリンやスレオニンのアミノ酸残基(Ser/Thr)に結合する糖鎖であり、UDP-GlcNAc-β-N-acetylglucosaminyltransferase(O-GlcNAc transferase)によって糖付加が行われると考えられている。この糖鎖の付加は細胞内蛋白(核蛋白、細胞質存在蛋白)のみに認められ、生命現象に重要な役目を担っていることが推測される。我々は、コレクチンの糖結合活性が上記の糖鎖とオーバーラップすることから、コレクチンのモチーフを利用して新規コレクチンのクローニングを企画し、細胞内糖鎖の機能を探ろうと考えた。1)我々は、膜タイプの新規コレクチンを想定し、その遺伝子クローニングを試み、本年度候補遺伝子の一つCL-P1遺伝子のクローニングに成功した。さらにCL-P1遺伝子を大腸菌で発現させ、抗体作成を行い、本レクチンが膜型のレクチンであることを証明した(論文投稿中)。その後本レクチンのマウスホモローグをクローニングした。本レクチン遺伝子は非常に遺伝子保存率が高く、生体にとって重要な働きをしていることが示唆された。2)レクチン遺伝子の機能を探るには、生体での役割探索が必須であり、いろんな大学、病院との共同研究をおこなっている。始めに大阪某市における健康診断において、ボランテアでの日本人正常値の検討を行った。約500人におけるMBL血中濃度では1-2mg/mlであり、遺伝子多型のアレル頻度は0.18であった(医学のあゆみ2000)。また北大第一内科との共同研究で、自己免疫性疾患とコレクチン遺伝子多型について検索を行った。その結果、慢性ウイルス感染症ではC型肝炎にて本レクチン(MBL)の血中濃度が高い患者は予後が良い事が推測された(Scan.J.Gasteroentelogy,2000)。さらに自己免疫性疾患(SLE,RA,Sjogren syndrome)では、本遺伝子の変異が高いことがみられた。今後本レクチンの測定が自己免疫性疾患のマーカーや予後判定の材料に使える可能性が考えられた。

O-GlcNAc glycan chain, protein chain and amino acid residue (Ser/Thr) binding to glycan chain, UDP-GlcNAc-β-N-acetylglucosaminyl transferase (O-GlcNAc transferase) binding to glycan chain, UDP-GlcNAc-β-N-acetylglucosaminyl transferase (O-GlcNAc transferase) binding to glycan chain. These glycoproteins are associated with intracellular proteins (nuclear proteins, cytoplasmic proteins), and are important for life phenomena. The sugar binding activity of the protein was investigated by using the new regulation of the protein binding activity and the function of the intracellular sugar binding activity. 1)We will continue to work on the new regulations for film and television, and we will continue to work on the new regulations for film and television. We will continue to work on the new regulations for film and television. We will continue to work on the new regulations for film and television. We will continue to work on the new regulations for film and television. We will continue to work on the new regulations for film and television. The CL-P1 gene was discovered in Escherichia coli, antibody production was carried out, and the membrane type was demonstrated (paper submission). This is the first time that I've seen you. The survival rate of this gene is very high, and the organism is very important. 2) To explore the function of the gene, it is necessary to explore the function of the organism, and to study the function of the organism. The health diagnosis of Osaka City began to be carried out. About 500 people have MBL blood concentration of 1-2mg/ml, genetic polymorphism frequency of 0.18 mg/ml (medical science 2000) The first internal medicine joint research of Peking University was carried out to investigate the polytype of immune diseases. The results showed that chronic hepatitis C infection was associated with high levels of MBL in patients with chronic hepatitis C infection (Scan. J. Gasterology, 2000). In addition, the immune diseases (SLE,RA,Sjogren syndrome) are different from each other. In the future, this study will determine the possibility of using materials for the determination of immune diseases.

项目成果

Zhao H.,Wakamiya,N.,Suzuki,Y.,Hamonko,M.T.,Stahl,G.L.: "Epitope mapping and functional characterization of a novel monoclonal antibody against human mannose binding lectin (MBL)."J.Immunol.. (In press).

赵 H.、Wakamiya, N.、Suzuki, Y.、Hamonko, M.T.、Stahl, G.L.：“针对人甘露糖结合凝集素 (MBL) 的新型单克隆抗体的表位作图和功能表征。”J.Immunol..（In

Sasaki,K.,Tsutsumi,A.,Wakamiya,N.,Ohtani,K.,Suzuki,Y.,Watanabe,Y.,Nakayama,N.,Koike,T: "Mannose binding lectin polymorphisms in patients with hepatitis C virus infection."Scand.J.Gastroenterology. 35. 960-965 (2000)

Sasaki，K.，Tsutsumi，A.，Wakamiya，N.，Ohtani，K.，Suzuki，Y.，Watanabe，Y.，Nakayama，N.，Koike，T：“丙型肝炎病毒患者的甘露糖结合凝集素多态性

若宮伸隆,鈴木定彦: "生体防御レクチンとしてのコレクチンファミリー"蛋白質核酸酵素. 45(5). 655-663 (2000)

Nobutaka Wakamiya、Sadahiko Suzuki：“作为生物防御凝集素的集合素家族”蛋白质核酸酶 45(5) 655-663 (2000)。

芥子宏行,大谷克城,坂本隆志,岸雄一郎,荒木宏昌,鈴木定彦,若宮伸隆: "日本人におけるMBL(Mannan-binding lectin)遺伝子変異と血中濃度の検討"医学のあゆみ. 194:12,. 957-958 (2000)

Hiroyuki Kazuko、Katsuki Otani、Takashi Sakamoto、Yuichiro Kishi、Hiromasa Araki、Sadahiko Suzuki、Nobutaka Wakamiya：“日本 MBL（甘露聚糖结合凝集素）基因突变和血液浓度的检查”《医学史》。 958 (2000)

Tsutsumi,A,Sasaki,K,Wakamiya,N,Ichikawa,K,Atsumi,T,Ohtani,K.,Suzuki,Y.,N.,Koike,T.,Sumida,T.: "Mannose binding lectin gene : polymorphisms in Japanese patients with systemic lupus erythematosus, rheumatoid arthritis and Sjogrens syndrome"Genes and Immunit

堤，A，佐佐木，K，若宫，N，市川，K，厚美，T，大谷，K.，铃木，Y.，N.，小池，T.，墨田，T.：“甘露糖结合凝集素基因：多态性