コネクシンの遺伝子変異解析による徐脈性不整脈の病因研究

连接蛋白基因突变分析研究缓慢性心律失常发病机制

• 批准号: 11877125
• 负责人: 丸山 徹
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11877125/
• 关键词: 不整脈; 伝導障害; コネクシン; 遺伝子; 心筋細胞; ギャップジャンクション

初年度は,徐脈性不整脈の症例の選択を行ってきた。徐脈性不整脈の症例は,九州大学医学部附属病院の洞不全症候群や房室ブロックおよびこれらに対してベースメーカー植え込み術を施行した症例で,器質的心疾患は除外した。得られた血液検体の白血球からDNAの抽出・精製を行い、DNA変異のスクリーニングを試みている。今年度は集められたDNAサンプルからの遺伝子変異の検索と同定・解析を以下の手順で進めている。コネクシン(Cx)のCx40(1077 base),Cx43(1149 base),Cx45(1191 base)について各々4セットのプライマーを設定し,PCRにてコネクシンのフラグメントを増幅し,これをホルムアルデヒド中で熱処理し,非変性ポリアクリルアミドゲルにて電気泳動,DNA-本鎖高次構造多型(SSCP)を解析する。しかし現段階で明らかなCxのmutationは得られていない。徐脈性不整脈の症例における心臓刺激伝導系のコネクシンは遺伝子変異によって機能変化している可能性も十分にあるが、一方で遺伝子変異は起こっておらず,変異のないコネクシンが加齢とともに退行変性(正常に機能しているコネクシンの数的減少)している可能性や、生成・分解をくり返すコネクシンが細胞表面へ発現する際に興奮伝導に重要な配列・配向を維持するか(機能しているコネクシンの分布の変化)という問題も多分に含まれていると考えられた。

In the early years of the year, the patient with arrhythmia and irregular pulse was selected as a patient. Examples of arrhythmia and irregular pulse, Kyushu University School of Medicine Affiliated Hospital's Insufficiency Syndrome The これらに対してベースメーカー Planting え込みを is performed in all cases, except for organic heart diseases. Get the white blood cells of the blood and the extraction and purification of the DNA, and the DNA transfection of the white blood cells. This year's annual collection is a collection of DNA's original content.コネクシン(Cx)のCx40(1077 base),Cx43(1149 base),Cx45(1191 base)についてeach々4セットのプライマーをSETし,P CRにてコネクシンのフラグメントをincreasing width,これをホルムアルデヒド中でheat treatmentし, non-changing ポリアクリルアミドゲルにてelectrophoresis, DNA-primary lock higher-order structural polytype (SSCP) analysisする.しかしNow stage で明らかなCxのmutationは got られていない. Examples of arrhythmia and arrhythmia pulse syndromeるが、One party's legacy 伝子変义は出こっておらず,変一のないコネクシンが加齢とともにdegradation (normal function しているコネThe reduction of the number of クシンのしているpossibility, the generation and decomposition of the をくりすコネクシンがthe cell surface へ発appearanceするinteriorにexcitationにguidanceになalignment・alignment maintenanceするか(functional しているコネクシンのdistributionの変化)というquestionも多分に containまれていると考えられた.

项目成果

Maruyama T, et al: "Na-K pump inhibition caused by chronic amiodarone in guinea pig myocardium."Heart & Vessels. 14. 216-223 (1999)

Maruyama T 等人：“慢性胺碘酮在豚鼠心肌中引起钠钾泵抑制。”心脏

Yanagi N, et al: "Alterations in electrical and mechanical activity in Langendorff-perfused guinea pig hearts."Pathophysiology. (in press).

Yanagi N 等人：“兰根多夫灌注豚鼠心脏中电和机械活动的变化。”病理生理学。

Haro,Takashi: "Severe thrombocytopenia caused by digitoxin intoxication in a patient with heart failure associated with Sjogren's syndrome."Japanese Circulation Journal. 64(8月号掲載予定). (2000)

Haro, Takashi：“与干燥综合征相关的心力衰竭患者因洋地黄毒苷中毒而导致严重血小板减少症”，《日本循环杂志》64（将于 2000 年 8 月号出版）。

Haro T, et al: "Severe thrombocytopenia caused by digitoxin intoxication in a patient with heart failure."Japanese Circulation Journal. 64,4. 309-311 (2000)

Haro T 等人：“心力衰竭患者因洋地黄毒苷中毒导致严重血小板减少症。”日本循环杂志。

Maruyama,Toru: "Na-K pump inhibition caused by chronic amiodarone in guinea pig myocardium."Heart and Vessels. (4月号掲載予定). (2000)

Maruyama，Toru：“豚鼠心肌中慢性胺碘酮引起的钠钾泵抑制。”《心脏与血管》（计划于 2000 年 4 月号出版）。