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ホルモン遺伝子を表皮細胞に導入することによるホルモンの全身への供給

将激素基因导入表皮细胞，供给全身激素

基本信息

批准号：
11877139
负责人：
中野創
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Hirosaki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2001
项目状态：
已结题

项目摘要

前年度の研究において作成したinsulin-like growth factor, growth hormone, erythropoietinの発現ベクターを、ヒロサキヘアレスラットの背部皮膚にnaked DNA法を用いて遺伝子導入し、血中に各遺伝子産物が検出されるかどうかをELISA法により検討した。遺伝子導入後、全ての生物活性物質について経時的な血中濃度の上昇が認められたが、24時間後を最高値とする一過性の発現にとどまった。次に、発現ベクターに用いるプロモーターの強さを検討するために、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ(CAT)遺伝子の上流に、サイトメガロウイルス、SV40ウイルス、ケラチン10遺伝子、I型コラーゲン遺伝子、あるいはエラスチン遺伝子のプロモーター領域を連結したレポーターコンストラクトをラット皮膚に導入し、24時間後に導入部組織を採取しCAT活性を行ったところ、サイトメガロウイルス、SV40ウイルスのプロモーターが最強の活性を有していた。次に遺伝子発現の細胞選択性を同様の実験系を用いて検討したところ、サイトメガロウイルスおよびSV40ウイルスでは表皮、真皮ともに強い発現が見られたが、表皮において約3倍強い発現が観察された。一方、表皮特異的発現遺伝子であるケラチン10のプロモーター活性は、表皮においてサイトメガロウイルスの約1/3であったが、真皮においてもプロモーター活性が認められた(表皮の1/20)。更に真皮特異的発現遺伝子であるI型コラーゲンおよびエラスチンプロモーターの活性は、真皮のみならず表皮においても認められ真皮と同等以上のプロモーター活性がみられた。

In the past year, the development of insulin-like growth factor, growth hormone, erythropoietin in the skin of the back was studied by naked DNA method, and the gene products were detected by ELISA method. After the introduction of the gene, the blood concentration of the whole bioactive substance increased at the time of treatment, and the highest value occurred after 24 hours. Next, the discovery of the strong model of the CCT (CAT) gene, the upstream model, the SV40 model, the CCT 10 gene, the I model CCT, the CCT 10 gene, the CCT 10 gene, After 24 hours, the CAT activity of the introduction part was increased, and the activity of the SV40 was increased. In addition, the cell selectivity of the second generation is similar to that of the third generation. The cell selectivity of the third generation is about 3 times stronger than that of the fourth generation. One side, epidermis specific development gene In addition, the dermal specific development gene is identified by the type I protein. The activity of the protein is similar to that of the dermis.