内部分泌撹乱化学物質の免疫測定法の開発に関する企画調査

内分泌干​​扰物免疫检测方法发展规划调查

• 批准号: 11897017
• 负责人: 伊吹 令人
• 金额: $ 0.45万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11897017/
• 关键词: 内分泌攪乱化学物質; 免疫測定

近年、内分泌撹乱化学物質に対して生物学的、医学的見地からのみならず社会的にも大きな関心がよせられ、種々の試料よりの、検出、定量が必要とされている。測定法としてはgaschromatography/mass spectrometry(GC/MS)が主体であり、数段階の前処理と高額の機器を必要とするため、測定可能な検体数の制限が大きい。このため、特殊な実験区画や高額の機器を必要とせず、多検体の同時測定の可能な免疫測定法の開発について検討した。これまで、生体中のホルモンである、thyroxineやestrogenについては、monoiodothyroxine,diiodothyroxine,triiodothyroxine,tetraiodothyroxineのようにヨードー原子の違いやestron,estradiol,estriolのように水素一原子の違いを認識する抗体が開発されており、estradiolについては無抽出で生体試料中のホルモンをpMレベルで検出する免疫測定法が開発されている。更に、超高感度免疫測定法では理論的にはzmolレベルの抗原の測定が可能であることが報告されている(Ann Clin Biochem 19:379,1982)。従って、内分泌撹乱化学物質についても特異性の高い高力価の抗体の開発により、様々な試料からの種々の撹乱物質の測定が可能な免疫測定法の開発が可能であると考えられる。ところで、内分泌撹乱物質にはestrogenと同程度の低分子が多く、このため、抗体の作製にはキャリアプロテインが必要である。キャリアプロテインとしては、BSA、サイログロブリン、などが汎用されてきたが、哺乳動物用のアッセイ系を開発するには貝類より得られる蛋白質であり、近年、合成ペプチドの抗体作製に適することの知られているKLHが、一方、内分泌撹乱物質による雄の雌化等で知られる貝類などの試料のdirect assay法の開発にはBSAが適すると考えられる。また、最適の抗体を得るためには、撹乱物質とキャリアプロテインの結合法についても検討が必要である。現在までのところ、bisphenol Aについては、ELISAが開発されており、フェノール類を中心に開発が進展するものと考える。

In recent years, endocrine-disrupting chemicals, biological and medical insights, socialにも大きな cares がよせられ, species 々の sample よりの, 検出, quantification がとされている. The main body of the measurement method is gaschromatography/mass spectrometry (GC/MS), the number of stages of pre-processing is high, the machine is necessary, and the measurement possibility is limited by the number of bodies.このため、Special な実験区 drawing やHigh-cost のmachine をNecessary とせず、It is possible to measure multiple bodies simultaneously のimmunoassay の开発について検 Discussion した.これまで、生生中のホルモンである、thyroxineやestrogenについては、monioodothyroxine,diiodothyroxine,triiodothyroxine,tetraiodothyroxineのようにヨードーatomic のviolation いやestron,estradiol,estriol のようにhydrogen atomic のviolation いをknow するantibody が开発されており, estradiol については non-extracted biological sample in のホルモンをpM レベルで検出 する immunoassay が开発されている. More recently, a report on the possibility of measuring the antigen of ultra-high-sensitivity immunoassay based on the theory of mole antigen was reported (Ann Clin Biochem 19:379, 1982).従って、Endocrine disrupting chemical substance についてもSpecific の高いHigh-strength価のantibody の开発により、様々なThe determination of the sample and the disturbance substance are possible and the immunoassay method is possible and the test is possible.ところで, endocrine disrupting substance にはestrogen とlow molecular weight が多く, このため, antibody production にはキャリアプロテインが である.キャリアプロテインとしては, BSA, サイログロブリン, などがgenerally used されてきたが, のアッセイ system を开発するにはshellfish よりget られるprotein であ for mammalsり, In recent years, synthetic antibodies have been produced by KLHがすることの知れているPrescriptions, endocrine disrupting substances, feminization of males and females, etc., direct test specimens of shellfish, etc. The assay method is open to the BSA test.また、Optimum antibody をgetting るためには、撹湹物 とキャリアプロテインのcombination method についても検検検がである. NOWまでのところ、bisphenol Aについては, ELISAが开発されており, フェノール中に开発が progress するものと考える.

项目成果

長谷川喜久: "内分泌かく乱物質の誘起する生殖障害機序に関する分子生物学的研究"農林水産業における内分泌かく乱物質の動態解明と作用機構に関する総合研究 研究推進評価会議資料. 25-26 (2000)

长谷川义久：“内分泌干扰物引起的生殖损伤机制的分子生物学研究”农林水产内分泌干扰物动力学和作用机制的综合研究研究促进和评估委员会材料25-26（2000）。