ノックアウトマウスを用いたCAD、ICADの生理作用の解析

使用基因敲除小鼠分析 CAD 和 ICAD 的生理效应

基本信息

  • 批准号:
    00J01937
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.92万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 财政年份:
    2000
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2000 至 2002
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

CADはアポトーシス時に活性化されるDNaseであり、死細胞内でのDNA分解を担っている。一方、アポトーシス細胞のDNA分解は、CADのみならず、死細胞を貪食した貪食細胞内のDNaseIIによっても担われていることが示唆されている。昨年度までに、DNaseIIは赤芽球から脱核した核DNAの分解に必須であり、DNaseIIが欠損すると赤血球造血に異常が生じることを示してきた。本年度は、アポトーシス細胞のDNA分解の分子機構並びに生理作用を明らかにするため、これまでに作製してきたCAD、DNaseIIそれぞれの欠損マウスに加え、CAD/DNaseII二重欠損マウスを作成し、これらを用いて解析を行った。すると、胎生17.5日目の胸腺細胞の数が、DNaseII欠損マウスでは野生型の29%、CAD/DNaseII欠損マウスでは12%に減少していた。細胞表面マーカーについてのFACS解析から、DNaseII欠損マウス、CAD/DNaseII欠損マウスでは、胸腺細胞の増殖、分化がプロT細胞ステージで抑制されていることが示された。これらの胸腺にはDNAを蓄積したマクロファージが観察された。そして、電子顕微鏡を用いた解析から、これらのDNAはマクロファージのリソソームに蓄積しており、そのDNAの形状は、CAD/DNaseII欠損マウスではインタクトな繊維状であるのに対し、DNaseII欠損マウスでは、より断片化された粒子状であることが示された。以上の結果より、生体内において、CAD及びDNaseIIがアポトーシス細胞のDNA分解に協調的に作用しており、胸腺でのアポトーシス細胞のDNA分解に異常が生じると、T細胞の発生が妨げられることが示された。
CAD is activated when it is released, and DNA decomposition in dead cells is affected. The DNA of a cell is broken down, CAD is broken down, dead cells are broken down, DNase II is broken down, CAD is broken down, and the DNase II is broken down. DNA-II DNA fragmentation is essential for the development of abnormal erythropoiesis. This year, the molecular mechanism of DNA decomposition and its physiological function are clearly defined. The number of thymocytes decreased by 29% in wild type and 12% in CAD/DNase II at day 17.5. FACS analysis, DNase II deficiency, CAD/DNase II deficiency, proliferation and differentiation of thymocytes, inhibition of T cell growth, etc. This is the first time The DNA was analyzed by electron microscopy, and the DNA was stored in the form of particles. The above results show that in vivo, CAD and DNase II play a coordinated role in DNA decomposition of dysfunctional cells, and T cell development is abnormal.

项目成果

期刊论文数量(1)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Kawane, K. et al.: "Impaired thymic development in mouse embryos deficient in apoptotic DNA degradation"Nature Immunology. 4(2). 138-144 (2003)
Kawane, K. 等人:“凋亡 DNA 降解缺陷的小鼠胚胎胸腺发育受损”《自然免疫学》。
  • DOI:
  • 发表时间:
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    0
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    川根 公樹;長田 重一;北村勝朗;T.Yamaguchi;広瀬 進;長田 重一;生田久美子;Katsuhisa Ozaki
  • 通讯作者:
    Katsuhisa Ozaki
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科学和数学专家熟练程度过程的定性分析

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