乳酸菌細胞膜上のビタミンB_<12>ターゲティング部位の性質と分析への応用

乳酸菌细胞膜上维生素B_<12>靶向位点的特性及其分析应用

• 批准号: 12019254
• 负责人: 佐藤 一精
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12019254/
• 关键词: ビタミンB_<12>; Lactobacillus helveticus; HPLCバイオオートグラフィー; ビタミンB_<12>の分析; B_<12>ターゲッティング部位

最近抗悪性貧血因子としてだけでなく動脈硬化症や精神障害への関与ということからも注目されているビタミンB_<12>含量が、Lactobacillus helveticusを用いて調製されたヨーグルト中では特異的に著減するが、本菌の細胞膜上におけるビタミンB_<12>ターゲッティング部位の存在がこのような特異的現象を起こす原因と考えられる。そこで本研究では、まず想定しているB_<12>ターゲッティング部位の存在について、MRS培地で培養して得た菌体を用いて検討を行った。次に細胞膜上に結合したB_<12>体の形態について検討した。更に完全型や不完全型のB_<12>類縁体がどのように認識されるのかを調べるとともに、細胞膜のB_<12>結合性を利用したB_<12>分析システムの開発の試みに発展させることを究極の目的として、B_<12>ターゲッティング部位の結合様式に対する知見を得ることを試みた。その結果得られた結果は次の通りである。1.L.helveticusB-1をMRS培地で培養しても発酵乳と同様にB_<12>の著減する現象が確認できたので、MRS培地で培養して得られた菌体と菌体膜部分を用いてB_<12>との反応性を検討し、この反応が非常に短時間に進行しB_<12>含量も著減することが判明した。。2.超音波処理後の菌体膜部分に結合させ、パパイン処理、エタノール抽出、部分精製したB_<12>の形態について検討を行い、HPLCバイオオートグラフィーで形態未知のB_<12>体が検出されたが、この未知B_<12>の性質等については今後の検討課題である。3.標識及び非標識B_<12>体と細胞膜ターゲッティング部位との反応性から、不完全型のB_<12>は反応せず分析に影響しないことを含めてビタミンB_<12>の分析の可能なことが明らかとなり、本研究の所期の目的がほぼ達成できた。

Recently, anti-anemia factors have been found to be related to atherosclerosis and mental disorders, and the B_content of Lactobacillus helveticus has been modulated by the use of Lactobacillus helveticus. The specific B_<12>content of Lactobacillus helveticus has been reduced. The specific B_content of Lactobacillus helveticus has been found in the cell membrane of Lactobacillus helveticus<12>. In this study, we investigated the effects of culture on the growth and development of bacteria<12>. Next, the cell membrane is bound to the B_<12>body and the morphology is examined. In addition, the complete and incomplete B-type molecules were identified and utilized in the development of B-type <12><12><12>molecules, and the final B-type molecules were identified and utilized in the development of B-type molecules<12>. The result is the result 1. L.helveticusB-1 was cultured in <12>MRS <12>medium and the decrease of B_<12>content was confirmed. 2. After ultrasonic treatment, the bacterial membrane was partially combined, the B_body was partially extracted, the B_body was partially refined, and <12>the B_body with unknown morphology was detected by HPLC<12><12>. 3. The <12><12>aim of <12>this study is to achieve the objective of the study.