Islet-3の下流で中脳・小脳形成を制御する因子の機能解析

Islet-3下游控制中脑和小脑形成的因素的功能分析

• 批准号: 12026243
• 负责人: 三枝 理博
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12026243/
• 关键词: ゼブラフィッシュ; 中脳後脳境界; 中脳; 小脳; 視蓋; nucleopondin; ephrin; Islet-3

LIM/homeodomain型転写因子Islet-3のドミナントネガティブ変異体(DN)をゼブラフィッシュ胚で過剰発現すると、中脳後脳境界(小脳原基)及び眼の形成が阻害される。そこで我々は中脳後脳境界形成の分子メカニズムを理解することを目的とし、Islet-3 DN過剰発現により発現が減少する遺伝子を探索して中脳後脳境界形成に重要な分子を網羅的に同定することを試みてきた。サブトラクション法によって単離されたクローン533は317アミノ酸からなる蛋白質をコードする新規遺伝子で、C末の近くにthrombospondin type I repeat(TSR)と核移行シグナル(NLS)を持つ。既知のTSRを持つ蛋白質は細胞外で働くが、この蛋白質は核に局在したことから、nucleopondin(ncp)と命名した。ncpは中脳後脳境界の背側部、終脳背側部、終脳と間脳の境界部などに発現している。Islet-3、fgf8、pax2.1等、中脳後脳境界の形成に必要な因子が機能しないとncpの発現が消失するので、ncpはこれらの因子とともに、あるいは下流で中脳後脳境界の形成に関与していることが示唆された。Ncpをゼブラフィッシュ胚で過剰発現すると、神経板前部の拡大、中軸中胚葉の低形成及びそれに伴う前脳腹側部の低形成、体軸の短縮などが観察された。これらの症状が生じる機構を解析することで、Ncpの機能を理解する手がかりが得られると考えている。Ncpと似た蛋白質をコードする遺伝子を、ヒト、マウスともに二つずつ見いだした。従って、ncpは脊椎動物で保存された新規の遺伝子ファミリーを形成すると考えられる。この他、ディファレンシャルディスプレー法による探索も既に終え、ephrin-A2、plexin-A2のゼブラフィッシュ相同遺伝子、中脳後脳境界の形成に必要なeng2と同様の発現パターンを示す新規遺伝子など、興味深い遺伝子を複数同定し、現在解析している。

LIM/homeodomain type writing factor Islet-3のドミナントネガティブ変variant (DN ) The をゼブラフィッシュembryo is the obstacle to the formation of the で剰発appearance, the middle and later primordial realm (small primordial base) and the eye.そこで我々は中脳后脳 realm formed molecule メカニズムをUnderstand することをpurpose とし、Islet-3 DN has gone through the process of reducing the amount of time it has left and exploring it.サブトラクション法によって単利されたクローン533は317アミノ acid からなるproteinをコードする新気伝子で、CEndのNearlyくにthrombospondin type I repeat(TSR)とnuclear transition シグナル(NLS)をholdつ. It is known that the TSR is an extracellular protein, the protein is a nuclear protein, and the nucleopondin (ncp) is a named protein. ncpは中脳后脳 realmのdorsal part, final 脳dorsal part, final 脳とbetween 脳の realm part などに発 appear している. Islet-3, fgf8, pax2.1, etc., the necessary factors for the formation of the middle and later realms, the functions of ncp, the appearance and disappearance ofするので、ncpはこれらのfactorとともに、あるいは indecentで中脳后脳 realm is formed by the gate and the gate that is formed. NcpをゼブラフィッシュEmbryo で 剰発 appear すると, the front part of the sacred plate, the central axis mesoblast The leaves are low and the ventral part is low, and the body axis is shortened.これらのsymptomsが生じるorganizationをanalyticsすることで, NCPのfunctionをunderstandingするhandがかりがgetられるとtestえている. Ncpとsimilar proteinをコードする伝子を、ヒト、マウスともに二つずつ见いだした.従って, ncpはvertebratesでpreservationされた新码の伝子ファミリーをformationすると考えられる.この他、ディファレンシャルディスプレー法によるExplorationもJiにEndえ, ephrin-A2 and plexin-A2 have the same properties子、中脳后脳 realm の成に必なeng2と同様の発 appear パターンをshow す新gui伝子など, 性情深い伝子をplural 同定し, ANALYSIS している now.