通过轻链磷酸化阐明轴丝动力蛋白的功能修饰机制-猫眼课题宝

通过轻链磷酸化阐明轴丝动力蛋白的功能修饰机制

批准号：

12030203

负责人：

稲葉一男

金额：

$1.86万

依托单位：

Tohoku University

依托单位国家：

日本

项目类别：

Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)

财政年份：

2000

资助国家：

日本

项目状态：

已结题

起止时间：

2000 至 --

来源：

https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12030203/

关键词：

鞭毛リン酸化プロテインホスファターゼ精子ダイニンプロテインキナーゼ軽鎖カルシウム

项目摘要

项目成果

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英文摘要

軸糸ダイニンの活性調節機構は、精子をはじめ種々の鞭毛繊毛の機能調節に欠くことのできないものである。我々はこれまで、サケ科魚類の精子運動の活性化時にリン酸化される外腕ダイニン軽鎖を同定し、そのcDNAクローニングに成功した。本年度は、この軽鎖のリン酸化に至る周辺経路を明らかにする目的で、軽鎖をリン酸かするプロテインキナーゼ、脱リン酸化するプロテインホスファターゼを中心に研究を進めた。軽鎖はcAMP依存的プロテインキナーゼによりリン酸化されるが、リン酸化部位を含むペプチドを大腸菌で発現したところ、このペプチドは軸糸のcAMP依存的プロテインキナーゼの良い基質となった。一方、この脱リン酸化に関与するホスファターゼを検討したところ、タイプ2Aのプロテインホスファターゼ(PP2A)を同定することができ、オカダ酸感受性の実験からもPP2Aがダイニン軽鎖ホスファターゼであることが明かとなった。一方、軸糸における軽鎖のリン酸化はカルシウムの存在下で著しく阻害される。このカルシウムに依存した脱リン酸化活性(PP2B活性)は軸糸に強く結合しており、オカダ酸による阻害を受けない。PP2Bの軽鎖リン酸化における機能を調べた結果、PP2BはcAMP依存的プロテインキナーゼの調節サブユニットのリン酸化に関与しており、間接的に軽鎖のリン酸化調節に関わっていることが明かとなった。以上、ダイニン軽鎖のリン酸化は複数の酵素による制御を受けており、このような厳密な制御のもと、軸糸運動が制御されていることが明らかになった。

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会议论文

Kazuo Inaba: "Conformational Changes of Dynein : Mapping and Sequence Analysis of ATP/Vanadate-Dependent Trypsin-Sensitive Sites on the Outer Arm Dynein b Heavy Chain from Sea Urchin Sperm Flagella."J.Biochem.. 127. 1115-1120 (2000)

Kazuo Inaba：“动力蛋白的构象变化：海胆精子鞭毛外臂动力蛋白 b 重链上 ATP/钒酸盐依赖性胰蛋白酶敏感位点的定位和序列分析。”J.Biochem.. 127. 1115-1120 (2000

DOI： --

发表时间：

期刊：

影响因子： --

作者：

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