軽鎖リン酸化による軸糸ダイニンの機能修飾機構の解明
通过轻链磷酸化阐明轴丝动力蛋白的功能修饰机制
基本信息
- 批准号:12030203
- 负责人:
- 金额:$ 1.86万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
- 财政年份:2000
- 资助国家:日本
- 起止时间:2000 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
軸糸ダイニンの活性調節機構は、精子をはじめ種々の鞭毛繊毛の機能調節に欠くことのできないものである。我々はこれまで、サケ科魚類の精子運動の活性化時にリン酸化される外腕ダイニン軽鎖を同定し、そのcDNAクローニングに成功した。本年度は、この軽鎖のリン酸化に至る周辺経路を明らかにする目的で、軽鎖をリン酸かするプロテインキナーゼ、脱リン酸化するプロテインホスファターゼを中心に研究を進めた。軽鎖はcAMP依存的プロテインキナーゼによりリン酸化されるが、リン酸化部位を含むペプチドを大腸菌で発現したところ、このペプチドは軸糸のcAMP依存的プロテインキナーゼの良い基質となった。一方、この脱リン酸化に関与するホスファターゼを検討したところ、タイプ2Aのプロテインホスファターゼ(PP2A)を同定することができ、オカダ酸感受性の実験からもPP2Aがダイニン軽鎖ホスファターゼであることが明かとなった。一方、軸糸における軽鎖のリン酸化はカルシウムの存在下で著しく阻害される。このカルシウムに依存した脱リン酸化活性(PP2B活性)は軸糸に強く結合しており、オカダ酸による阻害を受けない。PP2Bの軽鎖リン酸化における機能を調べた結果、PP2BはcAMP依存的プロテインキナーゼの調節サブユニットのリン酸化に関与しており、間接的に軽鎖のリン酸化調節に関わっていることが明かとなった。以上、ダイニン軽鎖のリン酸化は複数の酵素による制御を受けており、このような厳密な制御のもと、軸糸運動が制御されていることが明らかになった。
All kinds of flagella and flagella of different kinds of spermatozoa can be used to determine the activity of spermatozoa. During the activation of sperm motility in both medical and medical departments, acidification was performed on the external wrist. The results showed that the sperm motility was the same and cDNA was successful. This year, we need to know that the purpose of this year's research is to improve the quality of the research center. The cAMP-dependent and acidified sites are characterized by the presence of bacteria, the presence of bacteria, and the dependence of cAMP on cAMP. On the other hand, there is no difference between the acid treatment and the acid treatment. The acid sensitivity is the same as that of the acid sensitivity test (PP2A). The acid sensitivity is different from that of the PP2A. On the other hand, it is necessary to prevent the occurrence of acid treatment. The effect of deacidification activity (PP2B activity) on the activity of deacidification and acidification is very important. The results of the PP2B chemical acidification test, the results of the PP2B cAMP-dependent system, the chemical acidification mechanism, the chemical acidification mechanism, the cAMP-dependent mechanism, the acidification mechanism, the computer, the computer. In the above, the complex enzyme system is used to control the system, the system is used to control the system, and the system is used to control the system.
项目成果
期刊论文数量(3)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Kazuo Inaba: "Conformational Changes of Dynein : Mapping and Sequence Analysis of ATP/Vanadate-Dependent Trypsin-Sensitive Sites on the Outer Arm Dynein b Heavy Chain from Sea Urchin Sperm Flagella."J.Biochem.. 127. 1115-1120 (2000)
Kazuo Inaba:“动力蛋白的构象变化:海胆精子鞭毛外臂动力蛋白 b 重链上 ATP/钒酸盐依赖性胰蛋白酶敏感位点的定位和序列分析。”J.Biochem.. 127. 1115-1120 (2000
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Kazuo Inaba: "High Level of Protein Ubiquitination in Ascidian Sperm"In"Biology of Ascidians" (Sawada,Yokosawa, and Lambert, eds). (in press). (2001)
Kazuo Inaba:“海鞘精子中蛋白质泛素化水平高”,载于“海鞘生物学”(Sawada、Yokosawa 和 Lambert 编辑)。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Kazuo Inaba: "Molecular mechanism of the regulation of sperm motility-The role of protein phosphorylation in dynein-driven microtubule sliding."Proceedings of the JSPS-DOST symposium on Current Trends in Molecular Biology.. 1. 65-67 (2000)
Kazuo Inaba:“精子活力调节的分子机制 - 蛋白质磷酸化在动力蛋白驱动的微管滑动中的作用。”JSPS-DOST 分子生物学当前趋势研讨会论文集.. 1. 65-67 (2000)
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