课题基金 / 基金详情

タンパク質リン酸化による精子運動の分子制御機構の研究

タンパク質リン酸化による精子運動の分子制御機構の研究
蛋白质磷酸化调控精子活力的分子机制研究
批准号：
00F00179
负责人：
稲葉 一男
金额：
$0.77万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2000
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2000 至 2002
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-00F00179/
关键词：
ホヤダイニン精子軸糸プロテインキナーゼ鞭毛タンパク質リン酸化プロテインホスファターゼ

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项目成果

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本研究では,精子運動の分子調節機構を解明するために、原索動物カタユウレイボヤを用いて、特に(1)運動調節に必須な内腕中間鎖の同定とその機能解明、及び(2)新規カルシウム結合蛋白質の同定と軸糸内局在/機能の解析を行った。まず、内腕中間鎖については、クラミドモナス中間鎖IC140と相同性を示すものをホヤ精巣ESTデータベースから検索し、RACEによる全長cDNA配列の決定、発現蛋白質に対する抗体の作製、局在の決定、運動活性化前後における変化について調べた。その結果、ホヤ精子軸糸の中間鎖は、クラミドモナスよりもサイズの小さい116kDaであり、同様に内腕に局在することが明らかになった。また、二次元電気泳動による解析の結果、精子活性化物質SAAFの添加により精子が活性化される際に116kDa中間鎖が脱リン酸化されることが明らかになった。一方、抗軸糸血清を用いた精巣cDNAライブラリーのイムノスクリーニングにより、カルシニューリンBサブユニットと相同性を持つ新規の25kDaカルシウム結合蛋白質のクローンを複数単離することができた。抗体を用いた実験の結果、この蛋白質は軸糸から0.6M KCl抽出で可溶化されることがわかった。さらに、免疫電顕により、軸糸の外腕付近に局在することがわかった。0.6M KCl抽出画分をゲル濾過により分離すると25kDaカルシウム結合蛋白質は複合体として単離されてきた。二価性架橋試薬EDCを用いた架橋実験により、25kDaカルシウム結合蛋白質が、45kDaの蛋白質と複合体を作っていることが明らかになった。
期刊论文(2)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Padma, P.: "Identification of a novel leucine-rich repeat protein.."Mol. Biol. Cell. 14(in press). (2003)
Padma, P.：“鉴定一种新型富含亮氨酸的重复蛋白。”Mol。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Inaba, K.: "EST analysis of gene expression in testis of the..."Mol. Reprod. Develop.. 62. 431-445 (2002)
Inaba, K.：“睾丸基因表达的 EST 分析……”Mol。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
クシクラゲ櫛板の分子構造の解明と運動性フォトニック結晶開発に向けた基盤研究
  • 批准号：
    20K20583
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Challenging Research (Pioneering)
  • 资助金额：
    $16.39万
  • 财政年份：
    2020
  • 负责人：
    稲葉 一男
  • 依托单位：
    University of Tsukuba
ホヤ精子に存在する自己マーカーの構造解析と自己非自己認識における役割
  • 批准号：
    17657026
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 资助金额：
    $2.24万
  • 财政年份：
    2005
  • 负责人：
    稲葉 一男
  • 依托单位：
    University of Tsukuba
ホヤ精巣cDNAの網羅的解析による軸糸構築の分子的基盤の確立
  • 批准号：
    12202008
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
  • 资助金额：
    $0.0万
  • 财政年份：
    2000
  • 负责人：
    稲葉 一男
  • 依托单位：
    Tohoku University
軽鎖リン酸化による軸糸ダイニンの機能修飾機構の解明
  • 批准号：
    12030203
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
  • 资助金额：
    $1.86万
  • 财政年份：
    2000
  • 负责人：
    稲葉 一男
  • 依托单位：
    Tohoku University
海外基金