ショウジョウバエヘパラン硫酸3-O硫酸基転移酵素の構造と機能

果蝇硫酸乙酰肝素3-O磺基转移酶的结构和功能

• 批准号: 12033212
• 负责人: 中藤 博志
• 金额: $ 0.83万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12033212/
• 关键词: ショウジョウバエ; プロテオグリカン; ヘパラン硫酸; 硫酸基転移酵素; cDNA

ヘパラン硫酸は細胞表面や細胞外マトリックスの主要な構成成分として広く生体内に分布し、細胞増殖・分化、細胞接着、酵素反応調節といった様々な生物学的機能に関与する。ヘパラン硫酸と様々な結合タンパク質の特異的な相互作用は、ヘパラン硫酸の特定の硫酸化パターンにより調節されることが示唆されている。このヘパラン硫酸の各部位の硫酸化は、各硫酸基転移酵素(N、2-O、6-O、3-O-硫酸基転移酵素)により触媒されている。しかし個体発生におけるこれらの酵素の機能やその作用機構に関しては、未だに多くの点が不明である。本研究では、ヘパラン硫酸配列決定の律速段階を触媒すると考えられているヘパラン硫酸3-O-硫酸基転移酵素(HS3ST)に注目している。ショウジョウバエには2つのHS3ST遺伝子、DmHS3ST-a,-bが存在し、それぞれに対する全長のcDNAクローンを単離した。それぞれのmRNAを検出したところ、いずれの発生段階においても特定の組織や細胞に局在せず、広く分布することが明らかになった。初期胚への二本鎖RNA注入による機能阻害実験をおこなったところ、dHS3ST RNAを双方同時に注射した胚では歯状突起および頭部構造の欠失が観察された。一方、dHS3ST-B遺伝子を異所的に活性化すると背板機械感覚毛の形成に異常をきたすことから、ヘパラン硫酸の3-O位の硫酸化が特定のシグナル伝達系に必要であり、このシグナル系が初期胚の形態形成に機能していることが示唆された。

ヘ パ ラ ン sulfate は cell surface や extracellular マ ト リ ッ ク ス の な main composition と し て hiroo く raw distribution し に raised colonization, differentiation, cell, then, enzyme reverse 応 regulating と い っ た others 々 な biology function に masato and す る. ヘ パ ラ ン sulfate と others 々 な combining タ ン パ ク の specific な は interaction, ヘ パ ラ ン sulfate の specific の sulfating パ タ ー ン に よ り adjust さ れ る こ と が in stopping さ れ て い る. こ の ヘ パ ラ ン sulfate の parts の sulfating は move, the acid base planning enzyme (N, 2 -, 3 -, 6 - O O O - sulfuric acid base planning shift enzyme) に よ り catalyst さ れ て い る. し か し individuals born 発 に お け る こ れ ら の の enzyme function や そ の role institutions に masato し て は, not だ に more く の point が unknown で あ る. This study で は, ヘ パ ラ ン sulfuric acid with column decided の law speed Duan Jie を catalyst す る と exam え ら れ て い る ヘ パ ラ ン 3 - O - sulfuric acid sulfate base planning shift enzyme (HS3ST) に attention し て い る. シ ョ ウ ジ ョ ウ バ エ に は 2 つ の HS3ST heritage 伝, DmHS3ST - a - b が し, そ れ ぞ れ に す seaborne る span の cDNA ク ロ ー ン を 単 from し た. そ れ ぞ れ の mRNA を 検 out し た と こ ろ, い ず れ の 発 raw Duan Jie に お い て も specific の に bureau organization や cells in せ ず, hiroo く distribution す る こ と が Ming ら か に な っ た. Early embryo へ の 2 lock に called RNA よ る function resistance against be 験 を お こ な っ た と こ ろ, dHS3ST RNA を both に injection し た embryo で は 歯 protrusion お よ び tectonic の owe head loss が 観 examine さ れ た.​

项目成果

Toru Togawa: "Structural Analysis of Gen Encoding Cuticle Protein BMCP18, and Characterization of its putative Transcription Factor"Insect Biochem.Molec.Biol. (印刷中). (2001)

Toru Tokawa：“编码角质层蛋白 BMCP18 的基因的结构分析及其假定转录因子的表征”Insect Biochem.Molec.Biol（印刷中）。

中藤博志: "ヘパラン硫酸プロテオグリカンの機能の調節-ショウジョウバエを用いた解析について"日本生化学会(印刷中). (2001)

Hiroshi Nakato：“硫酸乙酰肝素蛋白多糖的功能调节 - 使用果蝇进行分析”日本生物化学学会（出版中）（2001 年）。

中藤博志: "ショウジョウバエ細胞膜プロテオグリカン機能の遺伝学的解析"日本生化学会. 5 (2000)

Hiroshi Nakato：“果蝇细胞膜蛋白多糖功能的基因分析”日本生化学会5(2000)。