セレクチンと糖鎖を介する細胞間コミュニケーション

通过选择素和糖链进行细胞间通讯

• 批准号: 12033217
• 负责人: 辻 勉
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Hoshi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12033217/
• 关键词: セレクチン; シアル酸; 細胞表面糖鎖; 細胞接着; 白血球; サイトカイン

P-セレクチンは,活性化された血小板と血管内皮細胞に発現する細胞接着分子であり,白血球表面の糖鎖リガンドに結合することによって血管損傷や炎症部位への白血球の集積の初期段階を媒介する。白血球表面のリガンドとしては,PSGL-1と呼ばれる糖タンパク質に存在するシアル酸を含む糖鎖構造とチロシン残基に付加する硫酸基が重要な役割を果たしていると考えられている。本研究では,化学的に合成された硫酸化シアル酸誘導体(NMS03)によりP-セレクチン依存的な細胞接着が制御される可能性について検討し以下の結果を得た。1.DNAトランスフェクションによりP-セレクチンを強制発現させたCHO細胞あるいはプレートに固相化した精製P-セレクチンに対し,蛍光色素BCECF-AMで標識したヒト白血病細胞株HL-60細胞を加え,40分後の細胞接着率を測定した。硫酸化シアル酸誘導体(NMS03)は,P-セレクチン-CHO細胞あるいは固相化P-セレクチンに対するHL-60細胞の接着を濃度依存的に阻害した。また,阻害に要する濃度は,ヘパリン,コロミン酸,デキストラン硫酸などの酸性多糖よりも低濃度であった。2.NMS03の共存下あるいは非共存下で,固相化P-セレクチン上でヒト末梢血単球を4時間培養後,その上清に放出されるTNF-α活性を測定したところ,NMS03によりTNF-αの産生および放出が阻害された。以上より硫酸化シアル酸誘導体がP-セレクチン依存性白血球接着反応の阻害を通じて炎症アレルギー反応を制御する可能性が示された。

P-protein activation mediates the expression of cell adhesion molecules in platelets and vascular endothelial cells, and the binding of glycoproteins on the surface of leukocytes to vascular injury and the early stages of leukocyte accumulation at inflammatory sites. The presence of PSGL-1, a carbohydrate on the surface of leukocytes, and the presence of acid, a carbohydrate structure, and a sulfate residue on the surface of leukocytes play an important role in this process. In this study, the following results were obtained from chemical synthesis of sulfated arachidic acid inducer (NMS03) and investigation of the possibility of P-linked cell-mediated inhibition. 1. CHO cells were exposed to P-selectron by DNA transfection and immobilized with purified P-selectron. The fluorescent pigment BCECF-AM was added to identify the leukemia cell line HL-60 cells, and the cell attachment rate after 40 minutes was measured. The sulfated acid inducer (NMS03) inhibited the growth of HL-60 cells in a concentration-dependent manner. The concentration of acid, sulfuric acid and acidic polysaccharide is low. 2. The activity of TNF-α released from the supernatant was measured after 4-hour culture of peripheral blood lymphocytes in NMS03. The production and release of TNF-α were inhibited by NMS03. The above results demonstrate the possibility that sulfated acid elicitors may inhibit the development of inflammatory response by inhibiting the development of P-dependent leukocyte response.

项目成果

K.Nagata,T.Tsuji 他: "Redistribution of P-selectin counter-ligands is prerequisite to superoxide anion production and release by human neutrophils."International Immunology. 12巻. 487-492 (2000)

K. Nagata、T. Tsuji 等人：“P-选择素反配体的重新分布是人类中性粒细胞产生和释放超氧阴离子的先决条件。”第 12 卷，487-492 (2000)。

J.Koike,K.Nagata 他: "Density-dependent induction of TNF-α release from human monocytes by immobilized P-selectin."FEBS Letters. 477巻. 84-88 (2000)

J. Koike、K. Nagata 等人：“固定化 P-选择素对人单核细胞中 TNF-α 释放的密度依赖性诱导”，477. 84-88 (2000)。