抗原受容体遺伝子の対立形質排除のメカニズム

抗原受体基因的等位排除机制

• 批准号: 12051212
• 负责人: 西住 裕文
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12051212/
• 关键词: 免疫グロブリン; 抗原受容体遺伝子; 遺伝子組み換え; 対立形質排除; 転写因子; B細胞; PU.1; ノックアウトマウス

本研究は、抗原受容体遺伝子のV(D)J組み換えを制御する分子機構を解明する事を通して、最終的に対立形質排除の分子メカニズムを明らかにすることを目的としている。申請者らは、Igκ軽鎖遺伝子のV-J組み換えを負に調節する、3'エンハンサー(E3')領域内のPU.1結合配列に会合し、PU.1の働きと拮抗する別の蛋白質がリプレッサーとして存在すると想定してスクリーニングを行い、B細胞に限局して発現するPU.1に類似の遺伝子prf(PU.1 related factor)を単離した。そこでこの新規タンパク質Prfの生理的な機能を解明するために、prf遺伝子欠失マウスの樹立を試み成功した。このノックアウトマウスは、正常に成長し繁殖した。まずIgκ軽鎖遺伝子のV-J組み換え制御に関し遺伝子欠損の影響を調べたが、野生型と同様にV-J組み換えは厳密な制御を受けていた。引き続いて発現が限局しているB細胞を中心に詳細な解析を加えた。FACscanにより主としてB細胞の分化過程に異常がないか解析したが、野生型と大きな変化は見られなかった。また脾B細胞の種々の刺激に対する増殖応答活性にも野生型と大差はなかった。しかしprf遺伝子欠失マウスは無免疫状態において血清中に野生型より数倍高い量の抗体を含んでいることが明らかとなった。その抗体中には抗核抗体など自己抗体も含まれており、マウスを長期飼育しておくと自己免疫疾患様の症状を呈することが期待される。これまでの解析の結果において、遺伝子欠損の影響が余りみられなかった理由の一つに、Prfと類似の転写因子PU.1及びSpi-Bが、Prfの機能を相補していた可能性がある。よってprfとPU.1あるいはSpi-Bとの多重遺伝子欠損マウスを作製していく必要があると思われる。今後はprf遺伝子欠失マウスの解析を進めると共に、再度Igκ軽鎖遺伝子のV-J組み換えを負に調節するリプレッサー候補因子を単離する必要があり、現在新たなスクリーニング方法を導入し、遺伝了探索を試みている。

The purpose of this study is to clarify the molecular mechanism of V(D)J group transformation of antigen receptor and finally to clarify the molecular mechanism of V (D) J group transformation. The applicant negatively regulates the V-J transition of Ig kappa chain protein, and the PU.1 binding and alignment in the 3'domain (E3'), and the PU.1 binding and antagonism in the presence of other proteins, such as protein PRF(PU.1 related factor), in the presence of B cells, and in the presence of B cells. This new regulation is aimed at understanding the physiological functions of PRF and establishing a successful PRF system. It grows normally and reproduces. The V-J group of Ig kappa chain gene is controlled by the gene damage, and the wild-type gene is controlled by the gene damage. A detailed analysis of B cell centers is presented. FACS scan shows that there are abnormalities in the differentiation process of B cells. A large difference in the proliferation of B cells In the absence of immune status, the serum contains several times the wild-type antibody. Antibodies include anti-nuclear antibodies, anti-nuclear antibodies and anti-nuclear antibodies. The result of this analysis is incomplete, and the influence of the missing element is incomplete. The reason for this is that Prf is similar to the writing factor PU.1 and Spi-B. The function of Prf is complementary. P.U.1 is the most important part of Spi-B. It is the most important part of Spi-B In the future, we will introduce new methods to analyze the missing elements and explore them again.

项目成果

Shunji,Miki: "Reduction of atherosclerosis despite hypercholesterolemia in lyndeficient mice fed a high-fat diet."Genes to Cells. 6. 37-42 (2001)

Shunji，Miki：“尽管高胆固醇血症，但在喂食高脂肪饮食的营养不良小鼠中，动脉粥样硬化有所减少。”《基因到细胞》。