免疫グロブリン遺伝子における対立形質排除の分子機構

免疫球蛋白基因等位排斥的分子机制

• 批准号: 11770167
• 负责人: 西住 裕文
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770167/
• 关键词: 免疫グロブリン; 抗原受容体遺伝子; 遺伝子組み換え; 対立形質排除; 転写因子; B細胞; PU.1; ノックアウトマウス; V(D)J組み換え; Prf

本研究は、抗原受容体遺伝子のV(D)J組み換えを制御する分子機構を解明する事を通して、最終的に対立形質排除の分子メカニズムを明らかにすることを目的としている。申請者らは、Igκ軽鎖遣伝子のV-J組み換えを負に調節する、3'エンハンサー(E3')領域内のPU.1結合配列に会合し、PU.1の働きと拮抗する別の蛋白質がリプレッサーとして存在すると想定してスクリーニングを行い、B細胞に限局して発現するPU.1に類似の遺伝子prf(PU.1related factor)を単離した。そこでこの新規タンパク質Prfの生モ理的な機能を解明するために、prf遺伝子欠失マウスの樹立を試み成功した。このノックアウトマウスは、正常に成長し繁殖した。まずIgκ軽鎖遺伝子のV-J組み換え制御に関し遺伝子欠損の影響を調べたが、野生型と同様にV-J組み換えは厳密な制御を受けていた。引き続いて発現が限局しているB細胞を中心に詳細な解析を加えた。FACscanにより主としてB細胞の分化過程に異常がないか解析したが、野上型と大きな変化は見られなかった。また脾B細胞の種々の刺激に対する増殖応答活性にも野生型と大差はなかった。しかしprf遺伝子欠失マウスは無免疫状態において血清中に野生型より数倍高い量の抗体を含んでいることが明らかとなった。その抗体中には抗核抗体など自己抗体も含まれでおり、マウスを長期飼育しておくと自己免疫疾患様の症状を呈することが期待される。これまでの解析の結果において、遺伝子欠損の影響が余りみられなかった理由の一つに、Prfと類似の転写因子PU.1及びSpi-Bが、Prfの機能を相補していた可能性がある。よってprfとPU.1あるいはSpi-Bとの多重遺伝子欠損マウスを作製していく必要があると思われる。今後はprf遺伝子欠失マウスの解析を進めると共に、再度Igκ軽鎖遺伝子のV-J組み換えを負に調節するリプレッサー候補因子を単離する必要があり、現在新たなスクリーニング方法を導入し、遺伝子探索を試みている。

In this study, the molecular structure of the V(D)J group of the antigen receptor gene was changed and controlled, and the molecular structure was clarified.通して, the final に対性体excluded molecule メカニズムを明らかにすることをpurpose としている. Applicant らは, Igκ軽狠伝子のV-J group みchange えをnegative にadjusted する, 3'エンハンThe combination of PU.1 and the antagonism of PU.1 in the field of サー(E3') B Cell's limited edition PU.1 is similar to PU.1's prf(PU.1related) factor)を単里した.そこでこの新码タンパクqualityPrfの生モ理的なFUNCTIONを解明するために, prf伝子无マウスのEstablishmentをtrialみsuccessした.このノックアウトマウスは, normal growth and reproduction.まずIgκ軽 lock 伝子のV-J group み change えcontrol に关 し 伝子无码 の Impact をThe wild-type べたが and the wild-type と同様にV-J group みchange the えは即 density and control をReceive けていた. The limitation of the introduction is the B cell center and the detailed analysis is added. FACscan is used to analyze the abnormal differentiation process of B cells and to analyze the abnormality of the differentiation process of B cells, and to analyze the abnormality of the Nogami type. The spleen B cells are stimulated and stimulated to proliferate and respond to wild-type and large differences. The amount of wild-type antibodies in the serum of those who have lost the immune status of the prf is several times higher than that of the wild-type antibodies. Anti-nuclear antibodies, anti-nuclear antibodies, auto-antibodies, auto-antibodies, auto-immune diseases, long-term feeding, auto-immune diseases, and auto-immune diseases.これまでのanalytic resultにおいて、弝子无码のeffectが窊みられなかったreasonの一つに、Pr fと is similar to の転WRITING FACTOR PU.1 and びSpi-Bが, PrfのFUNCTION を compatibility していたpossibility がある.よってprfとPU.1あるいはSpi-Bとのmultiple remaining 伝子 owed to マウスをproduced していく必があると思われる. From now on, Igκ軽 Lock 伝子のV-J group み change えをnegative に Adjustment するリプレッサー candidate factor を単するnecessary があり, now new たなスクリーニング method を introduction し, 缝子Exploration をtrial みている.

项目成果

Hashimoto,S.et al.: "Prf, a novel Ets family protein that binds to the PU.1 binding motif, is specifically expressed in restricted stages of B cell development"lnt.lmmunol.. 11. 1423-1429 (1999)

Hashimoto,S.et al.：“Prf，一种与 PU.1 结合基序结合的新型 Ets 家族蛋白，在 B 细胞发育的限制阶段特异性表达”lnt.Immunol.. 11. 1423-1429 (1999)

Horikawa,K.et al.: "Defective roles of Fyn and Lyn in lgD-and lgM-mediated signaling"lnt.lmmunol.. 11. 1441-1449 (1999)

Horikawa，K.等人：“Fyn 和 Lyn 在 lgD 和 lgM 介导的信号传导中的缺陷作用”lnt.Immunol.. 11. 1441-1449 (1999)

Shunji,Miki: "Reduction of atherosclerosis despite hypercholesterolemia in lyndeficient mice fed a high-fat diet."Genes to Cells. 6. 37-42 (2001)

Shunji，Miki：“尽管高胆固醇血症，但在喂食高脂肪饮食的营养不良小鼠中，动脉粥样硬化有所减少。”《基因到细胞》。

Katano,H.et al.: "Expression and antigenicity of human herpesvirus & encoded ORF 59 protein in AIDS-associated Kaposi's sarcoma"J.Med.Virol.. 59. 346-355 (1999)

Katano,H.等人：“人类疱疹病毒的表达和抗原性