感染防御応答初期における細胞間シグナル伝達に関与する活性酸素分子種の解明

阐明感染防御反应早期参与细胞间信号转导的活性氧分子种类

• 批准号: 12052216
• 负责人: 水野 雅史
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12052216/
• 关键词: Potato tubers; Oxidative burst; Ascorbate peroxidase; Elicitor; Glucan; Hydrogen peroxide

エリシターとしてラミナリン(直鎖状β-1,3-glucan)を用いてジャガイモ懸濁培養細胞に処理した場合、アスコルビン酸ペルオキシダーゼ(APx)の発現は約5時間後に極大に達したが、内在性アスコルビン酸含量を高めた場合は、その発現は10時間で極大に達しその後減少した。その原因を解明するためH_2O_2蛍光プローブであるDCFH-DAを用いて内在性H_2O_2含量を測定したところ、内在性アスコルビン酸含量を高めた区では、明らかにH_2O_2生成量が抑制されていた。さらに真菌細胞壁画分であるレンチナン(β-1,6-glucanを側鎖に持つβ-1,3-glucan)では、約2時間後に極大に達したが、プスチュラン(直鎖状β-1,6-glucan)では、発現は誘導されなかった。さらに細菌細胞壁画分であるLPS(リポポリサッカライド)で処理した場合も応答しなかった。これらのことから、細胞膜状に特定の多糖を認識するレセプターが存在しており、それを介して情報伝達が行われている可能性が示唆された。実際、昆虫においては、細菌と真菌由来細胞壁画分に対する認識の異なるToll-like receptorが存在していると言われており、シグナル伝達に関与していることが明らかにされている。活性酸素種については、H_2O_2およびNOC-18(一酸化窒素供与体)で刺激した場合、いずれの場合もAPxの発現は1時間以内に活性化された。このことから、真菌由来多糖で刺激した際、H_2O_2が発生していると考えられた。さらに、H_2O_2が感染防御応答におけるセカンドメッセンジャーであるかを確かめるために、ラミナリン処理により蓄積されp-coumaroyloctopamine含量をHPLCを用いて測定した結果、その含量は6時間まで経時的に増加し、その後減少した。したがって、H_2O_2が防御応答のシグナル伝達に関与していることが示唆された。

エリシターとしてラミナリン (straight-locked β-1,3-glucan) In the case of treatment of てジャガイモ suspension cultured cells, アスコルビン acid ペルオキシダーゼ(APx)の発appears に大に达したが after about 5 hours, inner nature アスコルビンIn cases where the acid content is high, the acid content will not appear until it reaches its maximum value after 10 hours, and it will decrease after that.そのCauseを明するためH_2O_2荍光プローブであるDCFH-DAを用いてIntrinsic H_2O_2 contentをMeasurement of したところ, intrinsic アスコルビン acid content を高めた区では, clear らかにH_2O_2 production amount がされていた. Fungal cell mural analysis of fungal cells , after about 2 hours, it will reach the maximum level, and the プスチュラン (straight-locked β-1,6-glucan) will appear, and the 発appears will induce the されなかった.さらにBacterial cell murals are divided into であるLPS (リポポリサッカライド) and the processing is done in different occasions.これらのことから、Cell membrane-shaped にspecific polysaccharide をKnowing the existence of するレセプターがしており、それを说してInformation伝达が行われている possibility が说 instigation された.実记, insect においては, bacteria and fungi origin cell mural analysis に対するKnowing のdifferent なる Toll-like The existence of receptors is われており, シグナル伝达に关 and していることが明らかにされている. The active acid species, H_2O_2, NOC-18 (mono-acidic acid donor), can be used in irritating situations and APx can be activated within 1 time.このことから, fungus-derived polysaccharide でstimulating した记, H_2O_2 が発生 していると考えられた.さらに、H_2O_2がInfection Defense Systemーであるかを正かめるために、ラミナリンtreatmentにより综合されp-c The content of oumaroyloctopamine was measured by HPLC and the result was that the content increased after 6 hours and decreased after the test.したがって, H_2O_2が Defense 応answer のシグナル伝达に关 and していることが时憆された.