哺乳類嗅覚系における新生神経細胞の動態を規定する機構の解析

哺乳动物嗅觉系统新生神经元动态调节机制分析

• 批准号: 12210052
• 负责人: 山口 正洋
• 金额: --
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12210052/
• 关键词: 神経細胞新生; 嗅球; 顆粒細胞; トランスジェニックマウス; GFP

本研究は、哺乳類の嗅覚系で恒常的に起こっている神経細胞新生の、脳機能における機能的意義と分子機構を知ることを目的としている。我々は既に、神経幹細胞に発現するネスチン遺伝子の発現調節領域の支配下にGFPを発現するトランスジェニックマウスを作製し、嗅球の介在神経細胞である顆粒細胞の新生を、GFPの蛍光によって可視化できる生体系を樹立しており、このマウスを用いて解析を行っている。新生顆粒細胞の動態が匂い刺激によってどのように影響を受けるかを検討するため、マウスの一方の鼻孔を焼却して塞ぎ、匂い刺激を偏側性に遮断した。まず、BrdU投与によって新生顆粒細胞を標識し、その動態を経時的に観察したところ,顆粒細胞の産生量や、嗅球への移動については匂い刺激を遮断した側と健常側の間で有意な差は見られなかったが、その後匂い刺激を遮断した側では新生顆粒細胞が急速に脱落、消失していくことが分かった。GFP蛍光に基づき新生顆粒細胞の形態を観察すると、神経突起の発達が著しく抑制されており、その伸長方向も正常と異なりばらつきが見られた。これらのことから、新生顆粒細胞の成熟過程が、匂い刺激に基づく神経活動によってコントロールされていることが判明した。逆に、強い匂い刺激を与えることの影響を調べるため、マウスにプロピオン酸を数ヶ月にわたり嗅がせ続けた。c-fos、zif268などの神経活動依存性に発現する分子の発現から、プロピオン酸によって嗅球の背内側部を中心とした特定の領域が活性化されることを確認した。現在その領域のGFP陽性顆粒細胞の数、形態について検討中である。また、嗅球のスライス培養、タイムラプス顕微鏡による観察法をセットアップしており、今後顆粒細胞の動態をリアルタイムで観察する予定である。

This study aims to investigate the role of the mammalian olfactory system in the development of neurogenesis, neurogenesis We are responsible for the regulation of the development of GFP, the regulation of the development of GFP, the regeneration of granulosa cells mediated by olfactory bulbs in neurons, the establishment of GFP, the visualization of GFP, and the analysis of GFP. The dynamics of the newborn granulosa cells are stimulated by the stimulation of the nasal cavity, and the stimulation of the nasal cavity is blocked. The number of granulosa cells produced, the movement of olfactory bulb, and the stimulation of the new granulosa cells were detected during the identification and dynamic period of the new granulosa cells. The morphological changes of GFP basal cells, the development of neuronal processes, and the normal elongation direction of GFP basal cells were observed. The maturation process of newborn granulosa cells was identified by the stimulation of basal nervous system activity. The opposite is true. The opposite is true. c-fos, zif268, c-fos, zif268, zif 268, zif The number and morphology of GFP-positive granular cells in the field are currently under investigation. In addition, the olfactory bulb culture, microscopical observation, and future observation of granulosa cell dynamics are scheduled.

项目成果

Yamaguchi M., et al.: "Visualization of neurogenesis in the mammalian central nervous system using nestin promoter-GFP transgenic mice."NeuroReport. 11・9. 1991-1996

Yamaguchi M. 等人：“使用巢蛋白启动子-GFP 转基因小鼠观察哺乳动物中枢神经系统的神经发生。”NeuroReport 11·9。

Sawamoto K., et al.: "Direct isolation of committed neuronal progenitor cells from transgenic mice co-expressing spectrally-distinct fluorescent proteins regulated by stage-specific neural promoters"Journal of Neuroscience Research. (in press).

Sawamoto K.等人：“从转基因小鼠中直接分离定型神经元祖细胞，该小鼠共表达由阶段特异性神经启动子调节的光谱不同的荧光蛋白”神经科学研究杂志。