CGH法で検出された高度増幅遺伝子部位からの特異的ペインティングプローブの開発

利用 CGH 方法检测的高度扩增的基因位点开发特异性绘制探针

• 批准号: 12213096
• 负责人: 田口 尚弘
• 金额: $ 2.62万
• 依托单位: Kochi Medical School
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12213096/
• 关键词: CGH; 固形腫瘍; ペインティングプローブ; 染色体; PCR; FISH

ヒト発癌のメカニズムを解明するため、横紋筋肉腫・胃腸管間質腫瘍より得られたDNAを使って、CGH(comparative genomic in situ hybridization)によるスクリーニングを行った。その結果、高度増幅領域が両者に高頻度に検出された。高度増幅領域は、横紋筋肉腫では1p31-p32、8q24、11q12-q13、12q13-14、18q12-q22、胃腸管間質腫瘍では3q25-28、5p、7q31であった。これらの領域で増幅している可能性のある既知の癌遺伝子を記載した;1p31-p32;c-jun、3q25-28;Evi1、PIK3CA、7q31;SLC2A2、met、8q24;c-myc、11q12-q13;bcl1、hst1、int2、12q13-14;CHOP、EWS、ATF1、WTF1、18q12-q22(q21);bcl2。横紋筋肉腫で見つかった1番と8番の高度増幅領域は、RT-PCR解析により1番染色体はc-jun、8番はc-mycであることが示唆される結果を得た。横紋筋肉腫で見つかった18番染色体長腕の高度増幅領域からは、染色体顕微切断・PCR法でペインティングプローブの作製に成功した。このプローブを使ってニホンザル、アカゲザルの染色体にFISHを行ったところ、特定染色体にバンド状の蛍光が見られ、サル染色体の同定に利用できることが分かった。胃腸管間質腫瘍で見つかった5番染色体短腕の高度増幅領域には癌遺伝子がほとんど報告されておらず、現在、解析を進めている。

ヒ ト 発 carcinoma の メ カ ニ ズ ム を interpret す る た め, horizontal grain, brawn swollen stomach tube, interstitial swollen sores よ り have ら れ た DNA を make っ て, CGH (comparative genomic in situ hybridization) に よ る ス ク リ ー ニ ン グ を line っ た. Youdaoplaceholder0 そ results, in the field of high growth, が and に high-frequency に検 output された. Hyperplasia domain で, transverse striated muscle swelling で 1p31-p32, 8q24, 11q12-q13, 12q13-14, 18q12-q22, gastrointestinal interstitial abscess で で 3q25-28, 5p, 7q31であった. The <s:1> れら で field で growth rate <s:1> て る る る possibility <s:1> ある it is known that the <s:1> cancer legacy 伝 を records are た; 1p31-p32; c-jun, 3q25-28; Evi1, PIK3CA, 7q31; SLC2A2, met, 8q24; c-myc, 11q12-q13; bcl1, hst1, int2, 12q13-14; CHOP, EWS, ATF1, WTF1, 18q12-q22(q21); "bcl2. Horizontal stripes brawn swollen で see つ か っ た 1 と 8-fold の は highly raised painting field, rt-pcr analytic に よ り 1 chromosome は c - jun, 8 times は c - myc で あ る こ と が in stopping さ れ た を る results. Horizontal stripes brawn swollen で see つ か っ た 18 times chromosomes long wrist の highly raised field picture か ら は, chromosome 顕 micro cutting, the PCR method で ペ イ ン テ ィ ン グ プ ロ ー ブ の cropping に successful し た. こ の プ ロ ー ブ を make っ て ニ ホ ン ザ ル, ア カ ゲ ザ ル の chromosome に FISH line を っ た と こ ろ, specific chromosome に バ ン ド shape の 蛍 が of light ら れ, サ の ル chromosomes with fixed に using で き る こ と が points か っ た. Gastric tube interstitial swollen sores で see つ か っ た's chromosome short arm の highly raised field picture に は carcinoma heritage 伝 son が ほ と ん ど report さ れ て お ら analytical を ず, now, into the め て い る.

项目成果

Karashima T et al.: "Numerical chromosomal changes in metastatic prostate cancer following anti-androgen therapy : Fluorescence in situ hybridization analysis of5 Japanese cases"Cancer Genetics & Cytogenetics. 120(2). 148-154 (2000)

Karashima T等人：“抗雄激素治疗后转移性前列腺癌的染色体数值变化：5例日本病例的荧光原位杂交分析”癌症遗传学

Murthy SS et al.: "Mapping ofAKT3, encoding a member of the Akt/protein kinase B family, to hyman and rodent chromosomes by fluorescence in situ hybridization"Cytogentics & Cell Genetics. 88. 8-40 (2000)

Murthy SS 等人：“通过荧光原位杂交将编码 Akt/蛋白激酶 B 家族成员的 AKT3 映射到海曼和啮齿动物染色体”Cytogentics

Hirai H et al.: "Chromosome differentiation of the Schistosoma japonicum complex"International Journal of Parasitology. 30. 441-452 (2000)

Hirai H 等人：“日本血吸虫复合体的染色体分化”国际寄生虫学杂志。

Sonobe H et al.: "A new human malignant peripheral nerve sheath tumor-cell line, HS-Sch-2, harbouring p53 point mutation"Int ernational Journal of Oncology. 17. 347-352 (2000)

Sonobe H 等人：“一种新的人类恶性周围神经鞘肿瘤细胞系 HS-Sch-2，含有 p53 点突变”国际肿瘤学杂志。

Liang S-B et al.: "Tetrasomy 12 in ovarian tumors ofthecoma-fibromagroup ; A FISH analysis using paraffin sections"Pathology International. 51. 37-42 (2001)

梁S-B等人：“卵巢肿瘤中的coma-纤维瘤组的四体性12；使用石蜡切片的FISH分析”国际病理学。