レトロトランスポゾンMAGGYのアクチベーションタギングへの利用

使用逆转录转座子 MAGGY 进行激活标记

• 批准号: 12876011
• 负责人: 土佐 幸雄
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12876011/
• 关键词: レトロトランスポゾン; トランスポゾンタギング; いもち病菌; Pyricularia grisea; Magnaporthe grisea; Magna porche grisea; GUS

前年度の結果より、MAGGYをPyricularia属菌ゲノムに導入して42C、2時間の熱処理をすると、効率よくそのプロモーターを活性化できることが明らかとなった。そこで、MAGGY全長を含むプラスミドpMGY70をハイグロマイシン耐性遺伝子を持つプラスミドpSH75とともにコムギいもち病菌Br48にco-transformationし、約100個の形質転換体を得た。これらと母菌Br48を熱処理し、生育、胞子の形態などを比較検討した。ある形質転換体は、母菌より強い熱耐性有するように思われたが、その差は小さく遺伝子単離実験に進むには不十分であった。つぎに、これらを熱処理後エンバク、コムギに接種し、接種後20Cおよび26Cで培養して病徴を比較検討した。母菌との差が見られるもの、すなわち母菌よりコムギに対する病原性が低下したものおよび母菌よりエンバクに対する病原性が増高したものがいくつか認められたが、繰り返し実験の結果、遺伝子単離に進めるほどの有意差は認められなかった。いくつかの形質転換体についてMAGGY挿入部位の塩基配列を検討したところ、いずれもAT richなnon-coding領域であった。以上のことから、MAGGYはタギングツールとして開発するには、(i)ゲノムにランダムに挿入する(ii)大量の形質転換体から望むものをスクリーニングするためにさらなる工夫が必要であると考えられた。

According to the results of the previous year, MAGGY was introduced into the Pyricularia genus fungus and subjected to a heat treatment of 42C and 2 hours, which made it clear that the effective membrane can be activated. The total length of MAGGY contains pMGY70, pSH75 and Br48, and about 100 morphologically transformed organisms are obtained. The mother bacterium Br48 was heat-treated, and the morphology of the spores was compared. In addition, the temperature of the parent bacteria is very high, and the temperature is very low. The characteristics of the disease were compared between 20C and 26C after inoculation. The pathogenicity of the parent bacteria is lower than that of the parent bacteria, and the pathogenicity of the parent bacteria is higher than that of the parent bacteria. In addition, the structure of the MAGGY is changed, and the base arrangement of the MAGGY is changed. The above is the first time that MAGGY has been able to open up,(i) it has to open up,(ii) it has to open up,(iii) it has to open up,(iv) it has to open up,(v) it has to open up

项目成果

lkeda, K. et al.: "Heat shock, copper sulfate and oxidative stress activate the retrotransposon MAGGY resident in the plant pathogenic fungus Magnaporthe grisea"Molecular Genetics and Genomics. 266. 318-325 (2001)

lkeda, K. 等人：“热休克、硫酸铜和氧化应激激活植物病原真菌稻瘟病菌中的逆转录转座子 MAGGY”分子遗传学和基因组学。