うつ病患者におけるグルココルチコイドホルモン受容体異常の分子生物学的検討-視床下部-下垂体-副腎系機能異常との関連-

抑郁症患者糖皮质激素受体异常的分子生物学研究-与下丘脑-垂体-肾上腺系统功能障碍的关系-

• 批准号: 12877149
• 负责人: 橋本 学
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12877149/
• 关键词: グルココルチコイド受容体; α、β isoform; うつ病; リンパ球; SSCP法; α,β isoform

本研究は、うつ病の原因遺伝子の候補として、HPA系で重要な役割を担うGC受容体遺伝子について検討するものである。人リンパ球を試料としてGC受容体遺伝子異常を検討する実験系を構築し、対照群と患者群のGC受容体遺伝子にどれほどの多系や変異が存在するかを検討した。まず、リンパ球を試料としてRT-PCR SSCP法を行った。対照群と患者群の血液を低浸透圧で溶血した後に遠心分離によりリンパ球を得た。リンパ球を蛋自変性剤中でホモジナイズしたライセートをRNA分離用スピンカラムで遠心分離し総RNAを得た。総RNAをPCRプライマーを用いて逆転写とPCR反応を1stepで行った。PCR用のプライマーは、既報のcoding regionを網羅し約400bpのPCR産物を作る様にデザインしたものを改め、coding regionに加えて、5'と3'のnon coding regionを網羅し、それぞれが約240bpのPCR産物を作る様にデザインした。このプライマーを用いて、1step RT-PCR法を行い、GC受容体のαとβのisoformに共通な領域のPCR産物10種と、αとβに特有な領域のPCR産物がそれぞれ11種と6種ずつ得られた。PCR産物にホルムアミドを加え加熱・急冷却することにより1本鎖化し、これを温度を15度に保ちSSCP用泳動装置でPAGEを行い、ゲルを銀染色することにより1本鎖化した2本のバンドを得た。対照群4人及ぴ患者群の4人のSSCPの結果では多系は確認されず、GC受容体遺伝子の多系の頻度は高くないと思われた。また、患者群のバンドを対照群と比較して移動度が変化した物はなく、患者遺伝子に変異は見つからなかった。今後も、今回構築した実験系を用いて、対照群と患者群の数を増やすことにより、うつ病患者のGC受容体遺伝子異常を検討していく予定である。

In this study, the cause of the disease, the cause of the disease, and the department of HPA are important for the treatment of the GC receptor. in this study, the cause of the disease and the cause of the disease. The human body was infected with GC receptacles. The patients were divided into two groups: the GC recipients, the patients, the patients and the patients. The RT-PCR SSCP method is used to determine the quality of the material. In the group of patients, the blood was low permeable, the hemolysis was low, and the heart was separated from each other. In the self-sex of the ball, you can use the RNA score to separate the heart from each other. "RNA" PCR "inverse" to write "PCR inverse" 1step "line". PCR uses the subscriber coding region, coding region, 5'3' non coding region, and 240bp coding region to modify the coding region, the coding region, the 240bp, the PCR, and so on. Using the method of 1step RT-PCR, the common field of PCR is 10%, and the field of α-β-isoform is 10%, while that of α-β-PCR is 11% and 6%, respectively, using the 1step RT-PCR method and the PCR method. The PCR temperature is 15 degrees Celsius, the temperature is 15 degrees Celsius, the SSCP swimming equipment is operated, the dyeing equipment is used, and the chemical treatment equipment is available. According to the group of 4 people and the patient group of 4 people, the results of SSCP results showed that most of the patients had confirmed the disease, and the children of the GC acceptor had a high degree of anxiety. The patients, the patients and the patients were compared. In the future and this time, the number of patients in the group of patients will be counted, and the GC receptor of the patients will often be predetermined.