T-cell receptor遺伝子再構成解析モデルとしての胸腺腫内環境の研究

胸腺瘤环境作为 T 细胞受体基因重排分析模型的研究

• 批准号: 12877200
• 负责人: 中島 淳
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12877200/
• 关键词: 胸線腫; 腫瘍内リンパ球; T細胞レセプター; 遺伝子再構成; フローサイトメトリー; TCR-β鎖; TCR-γ鎖; 腫瘍悪性度; 胸腺腫; 分化度; T-cell receptor; サザンブロット法; 胸腺癌

【背景】本研究の目的は胸腺腫腫瘍内リンパ球(TIL)の分化度・T細胞レセプター(TCR)遺伝子再構成を解析することにある。昨年度はTILの中にフローサイトメトリー(FCM)上認められている幼弱T系リンパ球においてTCR遺伝子再構成の存在を見出した。今年度はさらにこの減少について詳細な検討を加えた。【方法】ヒト胸腺腫中のTILについてDNAを抽出、サザンプロットハイプリダイゼーション法を行った。制限酵素はBAM-HI, ECO-RV(β), ECO-RI(γ), HIND IIIとし、TCR-βC, J region、TCR-γJ regionおよびTCR-δJ regionをプローブとして遺伝子再構成バンドを検出した。これと同時にCD4,8の発現をフローサイトメトリー(FCM)で測定し、病理組織学的特徴と併せて検討した。【結果】Stage I(encapsulated)(N=6),Stage III(invasive)(N=4)で解析した。病理組織はStage I(AB-B2)Stage III(B2-B3)に分布した。TCR-deltaの再構成はいずれも認められなかった。TCR-gammaの再構成はStage Iで5/6に、Stage IIIでは1/4例(B2)に認められた。TCR-beta再構成はTCR-gamma再構成のある症例では認められた。Stage Iで全例に、Stage IIIで2/4に認められた。TCR-beta遺伝子再構成が認められた胸腺腫TILはいずれもCD4/8 double positiveであり、再構成なしではCD4/8 single positiveであった。【考察】T-ce11の分化はgermlineからTCR-delta/gammaの再構成が最初に行われ、delta/gammaの再構成失敗例がTCR-alpha/betaの再構成を行うという階層的分化説に従えば、TCR-gamma遺伝子再構成は非常に未熟なT系列細胞で起こっていることとなる。また、悪性度の高い胸腺腫内では未分化なT細胞は認められず、フローサイトメトリーの所見と矛層しなかった。

Purpose の this study background 】 【 は within the thymus gland swollen swollen sores リ ン パ ball (TIL) の · T cell differentiation degrees レ セ プ タ ー (TCR) heritage 伝 son to constitute を parsing す る こ と に あ る. In yesterday's annual は TIL の に フ ロ ー サ イ ト メ ト リ ー (FCM) to recognize め ら れ て い る indecisive T series リ ン パ ball に お い て TCR heritage 伝 son again composition の を shows し た. For this year, さらに さらに えた に will be reduced by に さらに て て for detailed な検 and を will be added to えた. 【 method 】 ヒ ト の TIL in thymus swollen に つ い て を DNA extraction, サ ザ ン プ ロ ッ ト ハ イ プ リ ダ イ ゼ ー シ ョ ン line method を っ た. Limitations enzyme は BAM - HI, ECO - RV (beta), ECO - RI (gamma), HIND III と し, TCR - beta C, J region, which is the gamma J region お よ び TCR - delta region J を プ ロ ー ブ と し て heritage 伝 son to constitute バ ン ド を 検 out し た. こ れ と に CD4 at the same time, 8 の 発 now を フ ロ ー サ イ ト メ ト リ ー (FCM) determination of で し, pathological histology of 徴 と and せ て beg し 検 た. 【 Result 】Stage I(encapsulated)(N=6),Stage III(invasive)(N=4)で analysis た た. Pathological tissue に Stage I(AB-B2)Stage III(B2-B3)に distribution た. TCR-delta <s:1> reformation ずれ ずれ presumption められな った った. TCR - gamma の reconstitution は Stage I で 5/6 に, Stage III で は 1/4 cases (B2) に recognize め ら れ た. TCR-beta reformation TCR-gamma reformation <s:1> ある case で で められた recognition められた. Stage Iで full example に, Stage IIIで2/4に recognize められた. TCR-beta offspring 伝 reconstitute が to recognize められた thymoma TIL ずれ ずれ <s:1> CD4/8 double positiveであ <e:1> <e:1>, and reconstitute な で で CD4/8 single positiveであった. [investigation] T - ce11 の differentiation は germline か ら TCR - delta/gamma の reconstitution が first line に わ れ, delta/gamma の constitute failure cases again が TCR - alpha/beta の to constitute を line う と い う class differentiation said に 従 え ば, TCR - gamma 伝 child form again <s:1> very に unripe なT series cells で and <s:1> って る る ととなる ととなる. High の い ま た, 悪 degrees thymus gland swelling within で は undifferentiated は な T cells to recognize め ら れ ず, フ ロ ー サ イ ト メ ト リ ー の と spear seen layer し な か っ た.

项目成果

村川知弘,中島淳,河野匡,田中真人,竹内恵理保,岡輝明,高本眞一: "前縦隔原発胚細胞腫瘍の1例"胸部外科. 53(4). 345-349 (2000)

Tomohiro Murakawa、Jun Nakajima、Tadashi Kono、Masato Tanaka、Eriho Takeuchi、Teruaki Oka、Shinichi Takamoto：“前纵隔原发性生殖细胞肿瘤一例”胸外科 53(4)。

中島淳,田中真人,竹内恵理保,村川知弘,深見武史,高本眞一: "胸腺腫腫瘍内リンパ球のTCR遺伝子再構成のモノクローナリティーと悪性度"日本呼吸器外科学会雑誌. 14(3). 337 (2000)

Jun Nakajima、Masato Tanaka、Eriho Takeuchi、Tomohiro Murakawa、Takeshi Fukami、Shinichi Takamoto：“胸腺瘤瘤内淋巴细胞中TCR基因重排的单克隆性和恶性”日本呼吸外科学会杂志14（3）337（2000）。

Nakajima J,Takamoto S,Oka T,Tanaka T,Takeuchi E,Murakawa T: "Flow cytometric analysis of lymphoid cells in thymic epithelial neoplasms."European Journal of Cardio-thoracic Surgery. 18. 287-292 (2000)

Nakajima J，Takamoto S，Oka T，Tanaka T，Takeuchi E，Murakawa T：“胸腺上皮肿瘤中淋巴细胞的流式细胞分析。”欧洲心胸外科杂志。

中島 淳. 田中真人. 松本順. 竹内恵理保. 村川知弘. 深見武史. 高本眞一: "胸腺腫瘍内リンパ球T細胞レセプター遺伝子β鎖・γ鎖の再構成に関する検討"第21回日本胸腺研究会抄録集. 32 (2002)

Jun Nakajima、Masato Tanaka、Jun Matsumoto、Eriho Takeuchi、Tomohiro Murakawa、Takeshi Fukami、Shinichi Takamoto：“胸腺肿瘤中淋巴细胞 T 细胞受体基因 β 和 γ 链重排的研究”第 21 届日本胸腺研究会议摘要 32 (2002)。

中島淳,村川知弘,田中真人,竹内恵理保,深見武史,高本眞一: "腫瘍内リンパ球分化からみた胸腺癌の定義"日本外科学会雑誌. 101(臨). 154 (2000)

Jun Nakajima、Tomohiro Murakawa、Masato Tanaka、Eriho Takeuchi、Takeshi Fukami、Shinichi Takamoto：“从肿瘤内淋巴细胞分化的角度定义胸腺癌”，日本外科学会杂志 101（2000 年）。