T-cell receptor遺伝子再構成解析モデルとしての胸腺腫内環境の研究

胸腺瘤环境作为 T 细胞受体基因重排分析模型的研究

• 批准号: 12877200
• 负责人: 中島 淳
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12877200/
• 关键词: 胸線腫; 腫瘍内リンパ球; T細胞レセプター; 遺伝子再構成; フローサイトメトリー; TCR-β鎖; TCR-γ鎖; 腫瘍悪性度; 胸腺腫; 分化度; T-cell receptor; サザンブロット法; 胸腺癌

【背景】本研究の目的は胸腺腫腫瘍内リンパ球(TIL)の分化度・T細胞レセプター(TCR)遺伝子再構成を解析することにある。昨年度はTILの中にフローサイトメトリー(FCM)上認められている幼弱T系リンパ球においてTCR遺伝子再構成の存在を見出した。今年度はさらにこの減少について詳細な検討を加えた。【方法】ヒト胸腺腫中のTILについてDNAを抽出、サザンプロットハイプリダイゼーション法を行った。制限酵素はBAM-HI, ECO-RV(β), ECO-RI(γ), HIND IIIとし、TCR-βC, J region、TCR-γJ regionおよびTCR-δJ regionをプローブとして遺伝子再構成バンドを検出した。これと同時にCD4,8の発現をフローサイトメトリー(FCM)で測定し、病理組織学的特徴と併せて検討した。【結果】Stage I(encapsulated)(N=6),Stage III(invasive)(N=4)で解析した。病理組織はStage I(AB-B2)Stage III(B2-B3)に分布した。TCR-deltaの再構成はいずれも認められなかった。TCR-gammaの再構成はStage Iで5/6に、Stage IIIでは1/4例(B2)に認められた。TCR-beta再構成はTCR-gamma再構成のある症例では認められた。Stage Iで全例に、Stage IIIで2/4に認められた。TCR-beta遺伝子再構成が認められた胸腺腫TILはいずれもCD4/8 double positiveであり、再構成なしではCD4/8 single positiveであった。【考察】T-ce11の分化はgermlineからTCR-delta/gammaの再構成が最初に行われ、delta/gammaの再構成失敗例がTCR-alpha/betaの再構成を行うという階層的分化説に従えば、TCR-gamma遺伝子再構成は非常に未熟なT系列細胞で起こっていることとなる。また、悪性度の高い胸腺腫内では未分化なT細胞は認められず、フローサイトメトリーの所見と矛層しなかった。

Background: The aim of this study was to analyze the differentiation of thymic cysts and the reconstitutions of TCR genes. Last year, the existence of TCR gene recombination was revealed on the FCM. This year, we are going to reduce the number of cases. [Methods] DNA extraction from thymoma was carried out by using the method of DNA extraction and DNA extraction. The restriction enzymes BAM-HI, ECO-RV(β), ECO-RI(γ), HIND III, TCR-βC, J region, TCR-γJ region, TCR-δJ region, TCR-γ J CD4,8 was detected by FCM, and its pathological features were investigated. Stage I(encapsulated)(N=6),Stage III(invasive)(N=4) Pathology is divided into Stage I(AB-B2) and Stage III(B2-B3). TCR-delta re-composition TCR-gamma recombination Stage I 5/6, Stage III 1/4 (B2) TCR-beta reconstruction TCR-gamma reconstruction Stage I is full, Stage III is 2/4 full. TCR-beta gene recombination CD4/8 double positive CD 4/8 single positive [Investigation] T-ce11 differentiation and germline reconstruction TCR-delta/gamma reconstruction TCR-alpha/beta reconstruction TCR-alpha/beta reconstruction TCR-gamma reconstruction TCR-alpha/beta reconstruction TCR-gamma reconstruction T-gamma reconstruction TCR-gamma reconstruction TCR-gamma reconstruction T-gamma reconstruction TCR-gamma T-gamma reconstruction TCR-gamma T-gamma The undifferentiated T cells in the thymic tumors were found to be undifferentiated.

项目成果

村川知弘,中島淳,河野匡,田中真人,竹内恵理保,岡輝明,高本眞一: "前縦隔原発胚細胞腫瘍の1例"胸部外科. 53(4). 345-349 (2000)

Tomohiro Murakawa、Jun Nakajima、Tadashi Kono、Masato Tanaka、Eriho Takeuchi、Teruaki Oka、Shinichi Takamoto：“前纵隔原发性生殖细胞肿瘤一例”胸外科 53(4)。

中島淳,田中真人,竹内恵理保,村川知弘,深見武史,高本眞一: "胸腺腫腫瘍内リンパ球のTCR遺伝子再構成のモノクローナリティーと悪性度"日本呼吸器外科学会雑誌. 14(3). 337 (2000)

Jun Nakajima、Masato Tanaka、Eriho Takeuchi、Tomohiro Murakawa、Takeshi Fukami、Shinichi Takamoto：“胸腺瘤瘤内淋巴细胞中TCR基因重排的单克隆性和恶性”日本呼吸外科学会杂志14（3）337（2000）。

Nakajima J,Takamoto S,Oka T,Tanaka T,Takeuchi E,Murakawa T: "Flow cytometric analysis of lymphoid cells in thymic epithelial neoplasms."European Journal of Cardio-thoracic Surgery. 18. 287-292 (2000)

Nakajima J，Takamoto S，Oka T，Tanaka T，Takeuchi E，Murakawa T：“胸腺上皮肿瘤中淋巴细胞的流式细胞分析。”欧洲心胸外科杂志。

中島 淳. 田中真人. 松本順. 竹内恵理保. 村川知弘. 深見武史. 高本眞一: "胸腺腫瘍内リンパ球T細胞レセプター遺伝子β鎖・γ鎖の再構成に関する検討"第21回日本胸腺研究会抄録集. 32 (2002)

Jun Nakajima、Masato Tanaka、Jun Matsumoto、Eriho Takeuchi、Tomohiro Murakawa、Takeshi Fukami、Shinichi Takamoto：“胸腺肿瘤中淋巴细胞 T 细胞受体基因 β 和 γ 链重排的研究”第 21 届日本胸腺研究会议摘要 32 (2002)。

中島淳,村川知弘,田中真人,竹内恵理保,深見武史,高本眞一: "腫瘍内リンパ球分化からみた胸腺癌の定義"日本外科学会雑誌. 101(臨). 154 (2000)

Jun Nakajima、Tomohiro Murakawa、Masato Tanaka、Eriho Takeuchi、Takeshi Fukami、Shinichi Takamoto：“从肿瘤内淋巴细胞分化的角度定义胸腺癌”，日本外科学会杂志 101（2000 年）。