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口臭原因物質合成遺伝子の解析

分析合成引起口臭的物质的基因

基本信息

批准号：
12877338
负责人：
古賀敏比古
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12877338/
关键词：
口臭歯周病口腔内細菌メチルメルカプタン

项目摘要

口臭の原因物質として現在最も有力視されているのは揮発性硫化物(VSC)と総称される物質である。VSCは様々な組織為害作用を有することが報告されており、中でもメチオニンの分解産物であるメチルメルカプタンは歯周炎の発病との関連性が強いといわれている。そこで、本研究では、歯周病原性Porphyromonas gingivalisのメチルメルカプタン産生にかかわる遺伝子を同定し、その機能を解析した。先ず、P.gingivalis W83株、W50株及びATCC33277株、Fusobacterium nucleatum ATCC10953株、Actinobacillus actinomycetemcomitans Y4株などの歯周病細菌によるVSC産生をガスクロマトグラフィーにより調べた。その結果、P.gingivalisとF.nucleatumが多量のメチルメルカプタンを産生することが明らかになった。とくに、強毒株とされるP.gingivalis W83株のメチルメルカプタン産生能が高いことが判明した。そこで、P.gingivalis W83株のメチオニン分解酵素であるL-methionine-a-deamino-g-mercaptomethane-lyaseをコードする遺伝子(mgl)をクローニングしたところ、同構造遺伝子は1,200bpからなり、43.3kDaのタンパク質をコードしていることが明らかになった。ついで、同菌株を用いて薬剤耐性遺伝子による插入失活を行い、本遺伝子の欠損株を作製したところ、同変異株ではメチルメルカプタンが全く産生されなかった。以上の結果により、本酵素がP.gingivalisのメチルメルカプタン産生能に関与していることが明らかとなった。さらに、マウスの皮下にW83株とその形質転換株をそれぞれ注射し、致死率を比較することで病原性の変化を調べた。その結果、野生株と比較してmgl欠損株では致死率が低下していたことから、メチルメルカプタンがP.gingivalisの病原性に関わる因子の一つであることが示唆された。

The most potent cause of halitosis is VSC. VSC has a harmful effect on the tissues, and its decomposition products are strongly correlated with the development of periodontal diseases. In this study, we analyzed the function and identity of pathogenic Porphyromonas gingivalis. P. gingivalis W83, W50 and ATCC33277 strains, Fusarium nucleatum ATCC10953 strains, Actinobacillus actinomycetemcomitans Y4 strains, and VSC production were detected. The results of this study were as follows: P. genivalis, F.nucleatum, P. aurantium, P. aurantium, P. The production ability of P. genivalis W83 strain was determined to be high. P. genivalis W83 strain is isolated from the L-methionine-a-deamino-g-mercaptomethane-lyase gene and its isostructural gene is 1,200bp and 43.3kDa. In addition, the same strain is used for the resistance gene, the insertion inactivation is carried out, the defective strain of the original gene is controlled, and the same strain is used for the resistance gene. As a result, the enzyme P. genivalis produces a variety of enzymes. The pathogenicity of W83 strain was modulated by injection and lethality comparison. The lethality of P. gingivalis was lower than that of wild plants.