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表面プラズモン共鳴バイオセンサーを応用した歯周病の簡易診断法の開発

利用表面等离子共振生物传感器开发牙周病的简单诊断方法

基本信息

批准号：
10877338
负责人：
古賀敏比古
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10877338/
关键词：
歯周病歯周病細菌 BIAcore 血清型抗原多糖抗体価

项目摘要

近年、歯周炎のいくつかの病型は特異的な細菌により惹起されるとされている。そこで、歯肉縁下ブラーク中に生息する歯周病細菌の同定や血清中の歯周病細菌特異抗体価の測定が、歯周病の診断にとって重要だと考えられる。本研究では、表面プラズモン共鳴バイオセンサーであるBIAcore装置を用いて、Actinobacillusactinomycetemcomitans(Aa)の3種類め血清型特異多糖抗原に特異的な抗体価測定系の開発を目指した。まず、AaATCC29523株(a血清型)、Y4株(b型)、NCTC9710株(c型)の全菌体よりオートクレーブ法によりそれぞれ血清型a特異抗原(SPAa)、血清型b特異抗原(SPAb)、および血清型c特異抗原(SPAc)を抽出後、カラムクロマトグラフィー法により精製した。ついで、精製抗原をビオチン化したのち、ストレブトアビジンでコートされたBIAcore測定用センサーチップに固定化した。さらに、センサーチップ上に固定されたSPAa、SPAb、およびSPAcと各血清型のAa全菌体に特異的な抗体との反応をBIAcore装置を用いて測定した。その結果、血清型a特異抗体においてはSPAaで固定化したセンサーチップに対してのみ濃度依存的にRU (resonance unit)値の上昇が認められた。同様に、血清型b特異抗体と血清型c特異抗体はそれぞれSPAbとSPAcで固定化されたセンサーチップとのみ反応した。コントロールとして用いたウサギ非免疫血清では、RU値の上昇はいずれのセンサーチップにおいても認められなかった。以上の結果から、本検出系を用いることでAaの血清型特異抗体価の測定が可能であることが示された。

In recent years, peritonitis has been caused by a specific type of bacterium.そこで、The のラーク中に生する歯 disease bacterium is the same as the の歯 in the serum It is important to measure the specific antibodies of disease-causing bacteria and to diagnose the disease. This research is based on the use of surface プラズモンンバイオセンサーであるBIAcore device, Actinobacillusact Inomycetemcomitans (Aa) is a 3-type serotype-specific polysaccharide antigen-specific antibody test system with a specific detection system.まず, AaATCC29523 strain (a serotype), Y4 strain (b type), NCTC9710 strain (c type), whole cell よりオートクレーブ法によりそれぞれ serotype a Specific antigen (SPAa), serotype b specific antigen (SPAb), and serotype c specific antigen (SPAc) are extracted and purified by カラムクロマトグラフィー法により.ついで, purified antigen をビオチン化したのち, ストレブトアビジンでコートされたBIAcore measurement uses センサーチップにimmobilized した.さらに、センサーチップ上にfixedされたSPAa、SPAb、およびSPAcとeach blood The anti-antibodies specific to the clear type Aa whole cells were measured using the BIAcore device.その results, serotype a specific antibody においてはSPAa で immobilized したセンサーチップに対してのみ concentration-dependent にRU (resonance unit)夤のriseがcognizeめられた. Same as 様に, serotype b-specific antibody and serotype c-specific antibody はそれぞれSPAb and とSPAc でimmobilized されたセンサーチップとのみanti-anti-した.コントロールとして Use いたウサギnon-immune serum では, RU値のRISE はいずれのセンサーチップにおいてもcognize められなかった. The above results are indicative of the possibility of using the Aa serotype-specific antibody test to determine whether this test is possible.