コレラ菌の環境応答に対するべん毛運動と走化性の役割

鞭毛运动和趋化性对霍乱弧菌环境反应的作用

• 批准号: 15019039
• 负责人: 本間 道夫
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15019039/
• 关键词: 走化性; コレラ菌; シグナル伝達; べん毛; レセプター

コレラ菌は宿主体動物体内外での多様な環境中で生存するために、様々な刺激を認識し、それに対して適切な応答を行っている。コレラ菌の野生株にメチル化酵素CheR2を過剰発現して方向転換頻度の高い株とし、セリンまたはアラニンの走化性応答を調べた。次に、コレラ菌がこれらの化学物質の入ったcapillary内に誘引されるかどうか調べ、セリン、アラニン、システインを誘引物質と同定した。さらに胆汁が誘引作用を示したため、誘引物質の特定を検討している。一方、フェノールが忌避物質であることを示した。さらに、これらの物質を認識するレセプターについての研究を、大腸菌のタンパク質45種の遺伝子をクローン化し進めている。一方、コレラ菌の走化性相同遺伝子(che)群のうち、走化性への関与が考えられている領域IIについて、5つのcheY遺伝子をクローン化しその機能を調べた。結果、II領域のCheY3のみが大腸菌やコレラ菌の鞭毛回転を逆転させ、CheY3の野生型よりD16K変異体がより多くのタンブルを誘発していた。そこで、鞭毛回転方向制御にはII領域に存在するCheY3のみが関与すると結論した。続いて、IやIII領域のCheYの相互作用蛋白質を検索した。C末端にFLAGタグを付与したcheYホモログのconstitutive active変異体をコレラ菌に発現、精製し、その精製液をSDS-PAGEにかけた。CheYホモログと同時に精製されるタンパク質を検出し、その内すすぎ液には含まれない3種のタンパク質について、N末端の配列を決定した。その結果、HSP60、アクチンホモログであるMreB、toxin co-regulated pilusを構成するTcpAが同定された。現在、これらのタンパク質のCheY1との相互作用を確認し、他の共精製タンパク質についての同定を検討中である。

The bacteria live in a variety of environments in and out of the host animal. They recognize and respond appropriately to stimuli. The expression of CDR2 in the wild strain of C. sp. is regulated by the high frequency of change in direction and the low frequency of change in direction. In addition, the chemical substances introduced into the capillary-containing substances are also referred to as "attractants." The role of bile in attracting substances is discussed in detail. A party, a party. In addition, the study of Escherichia coli and 45 species of Escherichia coli has been carried out. A side, a side, a The results showed that the wild type of Chey3 in field II was induced by Escherichia coli and flagella. The results show that there is no correlation between the two. The interaction of protein in the middle, I and III domains was investigated. C-terminal FLAG is assigned to the constituent active species, and SDS-PAGE is used to extract, purify, and purify the protein. The quality of the product is determined by the quality of the product and the alignment of the N-terminal. Results, HSP60, TcpA, TcpB, TcpA, TcpA Now, the interaction between the two substances is confirmed, and the co-purification of the two substances is discussed.

项目成果

Harshey, RM., Kawagishi, I., Maddock, J., Kenney, LJ.: "Function, diversity, and evolution of signal transduction in prokaryotes."Developmental Cell. 4. 459-465 (2003)

Harshey, RM.、Kawagishi, I.、Maddock, J.、Kenney, LJ.：“原核生物信号转导的功能、多样性和进化。”发育细胞。

Fukuoka, H., Homma, M., Ichihara, S.: "Flagellum-independent Trail Formation of Escherichia coli on Semi-solid Agar."Biosci.Biotechnol.Biochem.. 67(8). 1802-1802 (2003)

Fukuoka, H.、Homma, M.、Ichihara, S.：“半固体琼脂上大肠杆菌的鞭毛独立轨迹形成”。Biosci.Biotechnol.Biochem.. 67(8)。