T-2トキシン誘発表皮細胞アポトーシスの発現機構

T-2毒素诱导皮肤细胞凋亡的机制

• 批准号: 01F00127
• 负责人: 土井 邦雄
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01F00127/
• 关键词: ラット; 表皮細胞; 初代培養系; T-2 toxin; アポトーシス; アポトーシス関連遺伝子

T-2 toxinはFusarium属真菌の産生するマイコトキシンで、リンパ造血系臓器にapoptosisによる組織傷害を惹起することで知られている。研究分担者のアルバレンケはこれまで、T-2 toxinを直接塗布したラット背部皮膚でも表皮細胞にapoptosisが惹起されることを初めて明らかにし、apoptosisの発現に関与する諸因子についてin vivoで検討を加えてきた。本研究では、真皮の影響を除去し、T-2 toxinの表皮細胞への直接作用を明らかにすべく、ラット由来表皮細胞初代培養系を確立した。ついで、この初代培養系に0.25μg/mlのT-2 toxinを添加し、0.5〜12時間後にかけて表皮細胞を単離して、細胞の生存率、形態変化およびRT-PCR法によるapoptosis関連遺伝子およびcytokine遺伝子のmRNAの発現の推移を検索した。その結果、細胞生存率は添加12時間後に40%に減少した。また、形態学的には、細胞体の萎縮と核濃縮を特徴とする表皮細胞のapoptosisが6時間後から認められ、その数は12時間後に最大値に達した。一方で、細胞増殖活性の指標であるPCNA陽性表皮細胞数は3から12時間後にかけて顕著に減少した。さらに、今回検索したapoptosis関連遺伝子およびcytokine関連遺伝子のうち、c-fos、c-junおよびTNF-αmRNAの発現は、apoptosisの発現に先立つ添加0.5時間後から顕著に増加した。こうした所見から、T-2 toxin誘発表皮細胞apoptosisにはc-fos、c-junおよびTNF-αが密接に関与していることが示唆された。また、こうしたin vitroの所見は上記のin vivoでの所見と良く対応していた。現在、この2年間で得られた研究成果を2編にまとめて国際学術誌に投稿すべく、準備中である。

T 2 toxin は Fusarium fungi の produce す る マ イ コ ト キ シ ン で, リ ン パ hematopoietic system viscera に apoptosis に よ る tissue damage を provoked す る こ と で know ら れ て い る. Research sharers の ア ル バ レ ン ケ は こ れ ま で, T 2 toxin を directly coated し た ラ ッ ト back skin で も に epidermis cells apoptosis が provoked さ れ る こ と を early め て Ming ら か に し, apoptosis の 発 now に masato and す る various factor に つ い て in vivo で を 検 please add え て き た. This study で は, leather の influence を remove し, T 2 toxin の epidermal cells へ の direct action を Ming ら か に す べ く, ラ ッ ト origin epidermal cells in the early generation of education department を establish し た. The first-generation culture line に0.25μg/ml <s:1> T-2 Toxin を add し, 0.5 ~ 12 time after に か け て epidermal cells を 単 from し の て, cell survival rate, morphological variations お よ び rt-pcr method に よ る apoptosis masato even heritage 伝 son お よ び cytokine heritage 伝 son の mRNA の 発 の now goes on を 検 cable し た. Youdaoplaceholder0 そ results: After adding for 12 hours, the cell survival rate に40%に decreased た た. ま た, morphological に は, shrinking potentials の と nuclear enrichment を 徴 と す る の epidermis cells apoptosis が six time after か ら recognize め ら れ, そ の 12 time after several は に maximum numerical に of し た. One party で, the <s:1> indicator of cell proliferation activity である, the number of pcNA-positive epidermal cells である 3 に ら12 time later, に けて顕 けて顕 に decreased by た た. さ ら に, today back to 検 し た apoptosis masato even heritage 伝 son お よ び cytokine masato even heritage 伝 son の う ち, c fos, c - jun お よ び TNF alpha mRNA の 発 は, apoptosis の 発 に now stand つ add 0.5 time before か ら 顕 with に raised し た. Seen こ う し た か ら, T 2 toxin induced 発 epidermal cells apoptosis に は c fos, c - jun お よ び TNF alpha が contact に masato and し て い る こ と が in stopping さ れ た. ま た, こ う し た in vitro は の see written の in vivo で と の see good く 応 seaborne し て い た. Now, over the past two years, で has obtained られた research results を2 compiled にまとめて international Academic journal に submitted to すべく and is in the process of preparation である.