速度差による濃縮法を利用したキャピラリー電気泳動による超高感度メタボローム分析

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枯草菌細胞抽出液中に含まれる代謝物の高感度網羅的分析法開発の一部として本研究を行っている。外国人特別研究員が来日前に博士課程研究で開発したキャピラリー電気泳動におけるpHジャンクション法を用いたオンライン試料濃縮法と,研究代表者らが開発したスウィーピング法とを組合せ,新たなオンライン試料濃縮法を開発し,リボフラビンおよびフラビン補酵素であるフラビンモノヌクレオチドおよびフラビンアデニンジヌクレオチドの高感度分析に適用したことは前年度報告に述べた。本年度はこの方法をさらに詳細に検討し,研究成果を論文として2報公表した。本年度は主として96本のキャピラリーを用いるマルチキャピラリー電気泳動(MCE)装置を利用したハイスループット分析法開発の基礎研究を行った。この装置では紫外吸光検出器を用いるので,対象代謝物としては,ヌクレオチド及びその代謝物を用い,pHジャンクションによるオンライン試料濃縮を利用した高感度分析法について検討した。多数の成分からなる混合物の分析では全成分を効率よく濃縮して,高感度に高分離で分析するのは困難であるので,特定の対象成分に適した濃縮及び分離条件を最適化した条件を採用するのが望ましい。MCE装置ではキャピラリーごとに分離条件を変えることが可能なので,多成分を同時に高感度分析できると考えられる。そのための装置の評価,実際にヌクレオチド及び代謝物の分析に適用してその可能性を検討した。再現性に問題はなく,50倍程度の感度向上が可能であった。本研究はまだ継続中であり,本特別研究員はもう半年間滞在予定なので,さらに研究の進展が期待できる。