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概日リズムの新規ペースメーカーホルモンの同定と構造機能解析

一种新型昼夜节律起搏激素的鉴定和结构功能分析

基本信息

批准号：
01J10322
负责人：
松島綾美
金额：
$ 1.92万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

概日リズムは生物界に普遍的に存在する生体リズムであり、生命活動の基底をなす重要な役割を果たしている。こうしたリズムの伝達を行う因子としてペプチドホルモンが関与していると考えられており、本年度は新規ペプチド性ペースメーカー候補の遺伝子単離を中心に次の実験を行った。1.新規概日リズム関連ペプチドのcDNAクローニング本研究ではFMRFアミド様ペプチドを新規の概日リズムペースメーカーホルモンペプチドの候補として取り上げている。今年度、このペプチドの遺伝子単離に成功した。当初脳からの遺伝子単離を試みたが成功せず、組織を胸部の神経節に変更し、イエバエおよびクロキンバエのFMRFアミド様ペプチドの遺伝子単離を達成した。この遺伝子はFMRFアミド様ペプチドに特徴的な4アミノ酸からなる配列(Phe-Met-Ark-Phe(アミノ酸一文字表記))を含むペプチドをイエバエでは18個、クロキンバエでは16個コードしており、ハエの仲間でもそのペプチドのアミノ酸配列や存在数に違いがあることが明らかとなった。解析した配列情報をもとに、クロキンバエ脳におけるin situハイブリダイゼーションを行った。その結果、脳内に約50個の細胞が検出された。また、単離したFMRFアミド様ペプチドと受容体の生理活性を見るために、配列を解明したペプチドを実際に化学合成し、ハマグリ心筋を用いた生理活性を測定したところ、実際に筋収縮増強活性があることが確認された。2.FMRFアミド様ペプチド受容体のcDNAクローニングショウジョウバエのFMRFアミド様ペプチド受容体の配列情報をもとに、イエバエおよびクロキンバエのFMRFアミド様ペプチド受容体の遺伝子単離に成功した。これらのアミノ酸配列は非常に相同性が高く、複数のFMRFアミド様ペプチドが存在する中でも配列が特によく似たものが結合すると考えられた。

In general, the existence of living organisms is widespread in the biological world, and the basic activities of life are important. This year's new rules for selecting candidates for the candidate list include the following: 1. In this study, FMRF was selected from the candidate list of the new definition. This year, the first batch of products was successfully sold. Within six days of successful attempts at genetic isolation, the tissues of the chest and the nerves were changed, and the genetic isolation of the FMRF sample from the IEEBA and KEROKINA was achieved. This selection contains 18, 16, and 18 of FMRF's characteristic 4-digit acid combinations (Phe-Met-Ark-Phe). Analysis of the distribution of information in the situation About 50 cells were detected in the test. The physiological activity of the receptor was determined by the method of chemical synthesis. 2. FMRF selection of the cDNA library of the receptor is successful. This is a very common arrangement, and a very complex arrangement of FMRF elements.