ヒトにも活性な昆虫成長因子GBPを受容するレセプターの蛋白質構造解析

昆虫生长因子 GBP 受体的蛋白质结构分析，该因子在人类中也具有活性

• 批准号: 13033013
• 负责人: 河野 敬一
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Toyama Medical and Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-13033013/
• 关键词: 昆虫; シグナル伝達; 蛋白質; レセプター; 立体構造

早川らは、寄生蜂が宿主に卵を産みつける際、宿主に誘導するペプチドであるGBPを発見した。GBPは高濃度で宿主幼虫の成長を抑制し、寄生蜂幼虫の成育環境を守るが、低濃度では逆に細胞成長因子他いくつかの機能を示すサイトカインでもあることが分かってきた。またGBPはヒトケラチノサイトに対してもEGFと同等の増殖活性を有していることが分かっているが、分子量がEGFの半分しかないGBPがEGFレセプターと結合し信号を細胞内に伝えることは驚くべきことである。本研究の目的は、GBPとレセプターの結合状態の立体構造解析を行い、その作用メカニズムを明らかにすることである。GBPレセプターについては、全長配列の決定を行った。現在、発現系を構築している。EGFレセプターの膜外ドメインについては、海外の共同研究者を得て発現精製のメドがたった事から、GBPとの相互作用解析を行なう。宿主体液中には、GBPと結合する可溶性の蛋白質が発見されており、この蛋白質とGBPの結合もGBPレセプター系のモデルとして興味深いので構造解析を行う。現在大腸菌による発現系を構築して蛋白質を得ており、BiacoreによるGBPとの相互作用解析を行なっている。リガンドの残基置換による活性変化からもレセプターとの相互作用を検討している。N末端およびC末端数残基をdeletionすることにより、細胞増殖促進活性と血球活性化活性が各々異なった影響を受けることから、両活性を発現するレセプターは別の分子であることが推定された(J. Biol. Chem.,24,31813-31818(2001))。またGBPのY11A変異体が2次構造をもたないにもかかわらず活性を有することから、TFE中ではGBPと同じ構造をもつ事を明らかにし、レセプター結合によるリガンド構造の誘導を示唆した(J. Biol. Chem.,in press)。

When the host eggs are laid, the host eggs are induced and the GBP is detected. At high concentrations, GBP can inhibit the growth of host larvae and maintain the breeding environment for parasitic wasp larvae. At low concentrations, GBP can demonstrate the other functions of cell growth factors. GBP has the same molecular weight as EGF and the same reproductive activity as EGF. The purpose of this study is to analyze the three-dimensional structure of the combined state of GBP and GBP, and to clarify the role of GBP in the development of GBP. The GBP has been selected for selection and selection of the full length. Now, the development system is constructed. EGF and GBP interaction analysis were conducted by co-researchers from overseas. Soluble proteins in host fluids that bind to GBP have been identified and structurally analyzed. Now E. coli is developing a system for protein synthesis, Biacore, GBP and interaction analysis. The interaction between the two groups was discussed. N-terminal and C-terminal residues are deleted, cell proliferation promoting activity and hemocyte activation activity are affected by different factors, and different molecules are presumed (J. Biol. Chem., 24,31813-31818(2001))。GBP Y11A has two kinds of structures, one is active, the other is TFE, and the other is active.(J. Biol. Chem., in press)。

项目成果

Yusuke Kato, et al.: "ABF-1 and ABF-2, ASABF-type antimicrobial peptide genes in Caenorhabditis elegans"Biochem. J.. 361. 221-230 (2002)

Yusuke Kato 等人：“秀丽隐杆线虫中的 ABF-1 和 ABF-2、ASABF 型抗菌肽基因”Biochem。

Naoki Fujitani, et al.: "Structure of the antimicrobial peptide Tachystatin A"J. Biol. Chem.. 277. 23651-23657 (2002)

Naoki Fujitani 等人：“抗菌肽 Tachystatin A 的结构”J。

Nozomi Koganesawa, et al.: "Construction of an expression system of insect lysozyme lacking thermal stability: the effect of selection of signal sequence on level of expression in the Pichia pastoris expression system"Protein Engineering. 14(9). 705-710 (

Nozomi Koganesawa 等人：“缺乏热稳定性的昆虫溶菌酶表达系统的构建：信号序列选择对毕赤酵母表达系统中表达水平的影响”蛋白质工程。

Kazunori Miura, et al.: "Solution structure of paralytic peptide of silkworm, Bombyx mori"Peptides. 23. 2111-2116 (2002)

Kazunori Miura 等人：“家蚕麻痹肽的溶液结构”肽。

Kazuo Masaki, et al.: "Thermal stability and enzymatic activity of a smaller lysozyme from silk moth(Bombyx mori)"J.Protein Chem.. 20(2). 107-113 (2001)

Kazuo Masaki 等人：“来自蚕蛾（Bombyx mori）的较小溶菌酶的热稳定性和酶活性”J.Protein Chem.. 20(2)。