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雑種神経細胞株NG108-15を用いた神経突起伸長の制御機構の解析

使用杂交神经元细胞系 NG108-15 分析神经突生长的控制机制

基本信息

批准号：
01J10766
负责人：
戸島拓郎
金额：
$ 1.28万
依托单位：
The University of Tokyo (2002)Hokkaido University (2001)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度は,神経回路形成における最も重要な現象の一つであるニューロンの神経突起形成・伸長制御機構について,特に神経突起形成・伸長の直接的な牽引力を提供する細胞骨格アクチン線維の動態に着目して解析した。生きた細胞内におけるアクチン線維の動態を可視化するために,Fluorescent Speckle Microsoopy (FSM)を適用した。FSMとは,蛍光標識された細胞骨格分子を少量細胞内に導入することで細胞骨格の動態を解析する方法である。標識分子は内在性の細胞骨格内にランダムに取り込まれて蛍光斑(speckle)を形成するため,speckleの移動を経時的に観察することで細胞骨格全体の動態が詳細に解析できる。その結果,神経突起形成時の細胞体周辺部に見られるラメラ構造(perisomatic lamella)や,伸長中の神経突起先端部に見られる成長円錐において,アクチン線維の後方移動を観察することに成功した。このアクチン後方移動が神経突起形成・伸長の直接的な牽引力を提供していると考えられる。ところで,神経突起の伸長・方向転換等の細胞運動は,細胞内セカンドメッセンジャーであるカルシウムによって制御を受けることが知られている。そこで次に,細胞内局所カルシウム上昇によるアクチン動態調節機構について解析した。細胞内に導入されたケージドカルシウムの光解離によって成長円錐内局所領域におけるカルシウム上昇を引き起こしたところ,アクチン後方移動の速度に有意な変化は見られなかった。この結果から,細胞内カルシウム上昇はアクチン後方移動の速度変化を引き起こす直接的な要因では黒いことが示唆された。現在は,もう一つの細胞骨格である微小管の生きた細胞内での動態を解析中である。

This year, the miraculous loop is the most important one, like the one in which the kingpin protuberance forms an elongated imperial arch, and the protuberance forms an elongated direct gravity force to provide the cellular skeleton, the cell, the engine, and the dynamic device. The Fluorescent Speckle Microsoopy (FSM) can be used in the cell, but not in the cell. FSM cells, a small amount of cellular bone molecules are entered into the cell cells, the dynamic state analysis method is used. The speckle in the internal cell of the tag element forms an image, and when the speckle moves the device, the whole cell will be analyzed. The results showed that when the neurite was formed, the periphery of the neurite was built (perisomatic lamella), the tip of the neurite grew and grew, and then moved to monitor the success of the cycle. The protuberance of the god is moved behind the bridge to form an elongated direct gravity force to provide testing and testing. The movement of the cells, such as the protuberance, elongation, and so on, and the control of the cells in the cell, such as the protuberance, elongation, direction, and so on. If you are in a bad situation, the internal bureau will tell you how to make sure that you do not know how to do the analysis. In the field of the growth of the system, there is a response in the field of the growth of the system, and the speed of movement is intended to change the speed. As a result of the results, the speed response after the loading of the device in the cell leads to a direct indication of instigation due to drug abuse. Now, we are in the process of analyzing the dynamics of microtubules.