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癌抑制遺伝子PTENの下流遺伝子の単離と機能解析

抑癌基因PTEN下游基因的分离及功能分析

基本信息

批准号：
01J60024
负责人：
鵜木元香
金额：
$ 1.28万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01J60024/
关键词：
癌抑制遺伝子 PTEN EGR2 BPOZ 細胞増殖抑制アポトーシス BNIP3L BAK

项目摘要

PTENのアポトーシス誘導機構に関わる遺伝子をcDNAマイクロアレイにて同定し、この中で卵巣癌において発現が低下している癌抑制遺伝子候補を6つ同定した。この6遺伝子を発現プラスミドベクターにて細胞内で発現させた結果、BPOZとEGR2が細胞増殖を顕著に抑制した。内因性BPOZとEGR2の発現抑制実験では細胞増殖が促進され、この2遺伝子の定常的な発現が異常な細胞増殖を抑制している事が示唆された。EGR2についてAd-EGR2を作製し、卵巣癌、子宮体癌、グリオブラストーマ、大腸癌、肝癌、肺癌などのさまざまな癌細胞株に感染させたところ、これらの癌細胞株に対してAd-EGR2はアポトーシスを誘導し、遺伝子治療への応用の可能性が示唆された。このアポトーシス誘導機構を解明するために、cDNAマイクロアレイを用いてEGR2の下流遺伝子を同定した。その結果、EGR2は、pro-Bcl-2 family蛋白の一員であるBNIP3LとBAKの発現を誘導し、また時間的に遅れて、TNFαの発現も誘導する事がわかった。さらなる検討により、EGR2はBNIP3LとBAKの発現を直接制御している事がわかった。またAd-EGR2の癌細胞への感染はミトコンドリアの膜電位を低下させ、ミトコンドリアからチトクロームcを放出させ、カスパーゼ3、8、9を活性化することも証明した。これらの結果より、EGR2はBNIP3LとBAKの直接の発現誘導を介してミトコンドリアからチトクロームcを放出させ、カスパーゼ9が活性化され、カスパーゼ3が活性化されアポトーシスに至る経路が提示された。またTNFαがカスパーゼ8を活性化し、カスパーゼ3が活性化されアポトーシスに至る経路も相乗的に働いている可能性が示唆され、PTEN-EGR2アポトーシス経路の一部を解明する事ができ、臨床応用への基礎の一部を確立する事ができた。

PTEN のアポトーシスinducing mechanism に关わる伝子をcDNAマイクロアレイにて同定し, この中 ovarian cancer において発appears がlow しているcancer suppression and remains a candidate を6 つ同定した. The result of この6缝子を発appears and the result of intracellular で発appears and させた, BPOZ and EGR2 がcell proliferation and inhibition of した. Endogenous BPOZ and EGR2 appear to inhibit cell proliferation and promote cell proliferation. 2. The abnormality of abnormal cell proliferation and the inhibition of normal cell proliferation are the symptoms of the disease. EGR2 Ad-EGR2, ovarian cancer, uterine cancer, colon cancer, colorectal cancer, liver cancer, lung cancer cancer cell linesにInfection of させたところ、これらのcancer cell line に対してAd-EGR2はThe possibility of use of アポトーシスを to induce and the treatment of への応のshows the instigation of された.このアポトーシスinducing mechanism するために, cDNA マイクロアレイをいてEGR2の缝子を同定した.そのRESULT, EGR2は, pro-Bcl-2 One member of the family protein is BNIP3L, BAK's appearance, induction of time, TNFα's appearance of time, and induction of TNFα.さらなる検により、EGR2はBNIP3LとBAKの発成をdirectly controls the している事がわかった. Infection of Ad-EGR2 cancer cells and low membrane potentialリアからチトクロームcをreleaseさせ、カスパーゼ3,8,9をactivationすることもproveした.これらのRESULT より、EGR2はBNIP3LとBAKのDirect の発appears to induce を Introduction してミトコンドリアからチトクロームcをreleasedさせ、カスパーゼ9がactivatedされ、カスパーゼ3がactivatedされアポトーシスに to る経路がcueされた.またTNFα active The possibility of multiplying the されアポトーシスに to the る経路も by multiplying the されアポトーシスにInstruction and guidance, PTEN-EGR2 アポトーシス経路の一一する事ができ, clinical application of へのBasic の一一一をEstablishment of する事ができた.