枯草菌における低分子量GTP結合蛋白質ファミリーの機能解析

枯草芽孢杆菌低分子量 GTP 结合蛋白家族的功能分析

• 批准号: 01J60073
• 负责人: 森本 拓也
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Nara Institute of Science and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01J60073/
• 关键词: 低分子量GTP結合蛋白質; 枯草菌; 染色体複製

1.枯草菌の細胞増殖に必須な6つの低分子量GTP結合蛋白質ファミリーについて、酵母2ハイブリッド法により得られた相互作用する因子との結合をin vitroで確認を行った。また、その中でBex蛋白質と相互作用する因子の1つが、Bex蛋白質の持つGTPase活性を正に調節する因子として働くことを見い出した。バクテリアの低分子量GTP結合蛋白質のGTPase活性を制御する因子の報告はこれまでに皆無であり、この発見はバクテリアのGTP結合蛋白質の研究に新たな概念を提起するものと考えられる。2.免疫沈降法により精製し、LCタンデムマススペクトルメトリーにより決定された複合体構成因子を酵母2ハイブリッド法により確認を行った。その結果、いくつかの因子との相互作用が確認された。この中には生育に必須である蛋白質も存在し、枯草菌低分子量GTP結合蛋白質ファミリーの必須性を説明する鍵となると思われる。3.in vitroの解析から、Bex変異の1つがGTP結合型変異であることを明らかにした。このことから、変異を導入した変異株は染色体複製開始に影響が見られることと、Bex蛋白質の減少により同じ影響が見られることからGDP結合型Bex蛋白質が染色体複製開始の制御を行うことを明らかにした。また、上記の酵母2ハイブリッドにより得られた因子の変異株における表現型とGTP結合型Bex変異株の表現型は一致した。この因子はこれまでに枯草菌の胞子形成、DNA取り込みに必要であることは報告されており、GTP結合型Bex蛋白質がこの因子と結合することにより機能を抑制することが示唆された。

1. The cell colonization of Bacillus subtilis must be confirmed by the combination of low molecular weight GTP binding protein and yeast 2-amino acid interaction factor. Bex protein interaction factor 1, Bex protein interaction factor 1 activity, GTPase activity, factor activity, factor activity, activity and activity. The low molecular weight GTP binding protein, the GTPase activity, the control factor, the report, the low molecular weight GTPase binding protein, the low molecular weight LMW binding protein, the low molecular weight LMW binding protein, the control factor, the report, the two。 Immunoprecipitation method was used to determine the expression of yeast 2, LC, yeast 2, yeast. Check the results and confirm that the factors interact with each other. It is necessary to determine the presence of low molecular weight GTP binding protein of Bacillus subtilis and the expression of low molecular weight protein of Bacillus subtilis. 3.in vitro parsers, Bex parsers, GTP combinators, GTP parsers, and parsers. In this case, the chromosome copy of the infected strain begins. The results show that the chromosome copy of the Bex protein is the same as that of the Bex protein. The GDP-binding Bex protein chromosome copy starts the system. The factors were obtained from yeast 2 strain and yeast 2 strain. The GTP combined Bex strain was the same as the other two strains. Factors affecting the formation of Bacillus subtilis spores, DNA screening, necessary reports, and GTP-combined Bex protein assay were used to inhibit the formation of spores of Bacillus subtilis, and the combination of GTP-binding protein factor and Elisa could effectively inhibit the formation of spores.

项目成果

Takuya Morimoto: "Six GTP-binding proteins of the Era/Obg family are essential for cell growth in Bacillus subtilis"Microbiology. 148. 3539-3552 (2002)

Takuy​​a Morimoto：“Era/Obg 家族的六种 GTP 结合蛋白对于枯草芽孢杆菌的细胞生长至关重要”微生物学。