アポトーシスシグナルにおける活性酸素の意義

活性氧在细胞凋亡信号中的意义

• 批准号: 01J60080
• 负责人: 佐藤 勉
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01J60080/
• 关键词: アポトーシス; 活性酸素

Fas刺激がJurkat細胞にアポトーシスを誘導する際,Apaf-1,procaspase-9およびcytochrome cはアポトソーム複合体を形成し,その結果,アポトーシスの実行に必須であるprocaspase-3が活性化される.まず,我々は抗procaspase-9抗体を用いた免疫沈降法により,Fas刺激でアポトソーム形成が誘導されることを確認した.次に,NACやMnSOD遺伝子導入によって活性酸素を消去したところ,アポトソームの形成は著明に抑制された.更に,この結果をゲル濾過法によって確認した.これらの結果から,活性・酸素はアポトソーム複合体形成を促進することによってアポトーシスシグナルに関与すると推測された.2.上述した仮説をin vitroで証明することを目的に,Apaf-1およびprocaspase-9の発現ベクターを構築した.in vitro translation法によってこれらの蛋白を合成し,ヒト胎盤から精製したcytochrome cとあわせ,in vitroでアポトソームの形成を再現した.上記3種類の蛋白を一括して還元剤で処理したところ,アポトソームの形成は阻害されたが,更に酸化剤で処理すると複合体形成能は回復した.また,3種類の蛋白を別個に還元剤で処理したところ,Apaf-1を処理した場合にだけアポトソームの形成阻害が観察された.これらの結果から,活性酸素によるアポトソーム複合体形成の促進は,Apaf-1が酸化されることによって引き起こされると考えられた.

Fas stimulates Jurkat cells to induce significant changes. Apaf-1,procaspase-9 induces the formation of a complex of cytochrome c cells. The results show that the activation of procaspase-3 is required. The anti-procaspase-9 antibody was detected by immunoprecipitation assay, and Fas was used to stimulate the immune response. For the second time, the NAC MnSOD seed was added to the active acid to eliminate the active acid, and the formation of the active acid was clear that the inhibition effect. More importantly, the results show that the procedure is not valid. The results showed that the active acid complex was formed to promote the formation of the complex. 2. The purpose of this study is to understand the purpose of the above information. Apaf-1, procaspase-9, in vitro translation, in vitro translation, cytochrome c, protein synthesis, in vitro, protein synthesis, protein synthesis and protein synthesis. In the last 3 years, the proteins in the above three kinds of proteins are very important, and the formation of the complex is very important. In addition, three different levels of protein are used to analyze the performance of the system, and the Apaf-1 system is used to monitor the impact of the product. The results showed that the formation of active acid complex was accelerated, and Apaf-1 acidification was used to induce the formation of complex.

项目成果

Matsunaga T, Sato T, et al.: "Interaction between leukemic-cell VLA-4 and stromal fibronectin is a decisive factor for minimal residual disease of acute myelogenous leukemia."Nat Med. 9(9). 1158-1165 (2003)

Matsunaga T、Sato T 等人：“白血病细胞 VLA-4 和基质纤连蛋白之间的相互作用是急性髓性白血病微小残留病的决定性因素。”Nat Med。

Takahashi M, Sato T, et al.: "E1B-55K-deleted adenovirus expressing E1A-13S by AFP-enhancer/promoter is capable of highly specific replication in AFP-producing hepatocellular carcinoma and eradication of established tumor."Mol Ther. 5(5Pt1). 627-634 (2002

Takahashi M、Sato T 等人：“通过 AFP 增强子/启动子表达 E1A-13S 的 E1B-55K 缺失腺病毒能够在产生 AFP 的肝细胞癌中高度特异性复制并根除已形成的肿瘤。”Mol Ther。

Hagiwara S, Sato T, et al.: "Inhibition of type I procollagen production by tRNAVal CTE-HSP47 ribozyme."J Gene Med. 5(9). 784-794 (2003)

Hagiwara S、Sato T 等人：“tRNAVal CTE-HSP47 核酶抑制 I 型原胶原产生。”J Gene Med。

Kawano Y, Sato T, et al.: "Ex vivo expansion of human umbilical cord hematopoietic progenitor cells using a coculture system with human telomerase catalytic subunit (hTERT) transfected human stromal cells."Blood. 101(2). 532-540 (2003)

Kawano Y、Sato T 等人：“使用与人端粒酶催化亚基 (hTERT) 转染的人基质细胞共培养系统，对人脐带造血祖细胞进行离体扩增。”血液。

Sasaki H, Sato T, et al.: "Induction of heat shock protein 47 synthesis by TGF-beta and IL-1 beta via enhancement of the heat shock element binding activity of heat shock transcription factor 1."J Immunol. 168(10). 5178-5183 (2002)

Sasaki H、Sato T 等人：“TGF-β 和 IL-1β 通过增强热休克转录因子 1 的热休克元件结合活性诱导热休克蛋白 47 合成”。