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枯草菌胞子形成期におけるDNA再編成

枯草芽孢杆菌孢子形成阶段的 DNA 重排

基本信息

批准号：
06780554
负责人：
佐藤勉
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Tokyo University of Agriculture and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

in vivoの実験結果からspoIVCAの転写に関与することが示唆されたSpoIIIDタンパク質を大腸菌内で大量に発現させ、カラムクロマトグラフィーにより精製をおこなった。このタンパク質のspoIVCA上流領域への結合能をDNaseIフットプリンティング法により調べた結果、-14〜-34の領域にSpoIIIDが結合することが明らかとなった。次に枯草菌のT_3の細胞より精製したEδ^Eを用いて、spoIVCAを鋳型としたin vitro転写系に、SpoIIIDタンパク質を添加した。この結果、spoIVCAの転写産物はEδ^Eのみを添加した場合では検出されず、Eδ^EとSpoIIIDを添加した場合にのみ検出された。これらの結果より、枯草菌胞子形成期におこるDNA再編成に関与するspoIVCAの転写はEδ^EとSpoIIIDにより正に制御されていることがin vitroにおいても明らかとなった。さらに、spoIVCA以外のEδ^Eで転写される遺伝子群(spoIID,spoVE)の発現に対するSpoIIIDの関与を調べるために、SpoIIIDを用いたDNaseIフットプリンティング、in vitro転写実験をこれらの遺伝子のプロモーターを含むDNA断片を用いておこなった結果、SpoIIIDはspoIID,spoVEの転写を負に調節していることが明らかとなった。また、spoIVCAのプロモーターを枯草菌で誘導可能なspacプロモーターに置き換えた融合遺伝子を染色体上に構築し、spoIVCAを栄養増殖期に強制発現させ、DNA再編成の有無を調べた。この結果、DNA再編成がおこらず、DNA再編成に直接関与するSpoIVCA以外の因子が胞子形成期特異的に存在することが示唆された。この因子はSpoIIIDである可能性があり現在解析をおこなっている。

The results of in vivo tests show that there is a significant increase in the number of bacteria in the bacteria caused by SpoIIID. The results show that there are a large number of bacteria in the bacteria. The results show that there are a large number of bacteria in the bacteria. The results show that there are a large number of bacteria in the bacteria. In order to improve the performance of the high-level spoIVCA, the results of the analysis of the results of the DNaseI system, the SpoIIID of the 34-year-old system, and the performance of the system are very important. Subtilis subtilis T3 cells, fine cells, E δ ^ E, spoIVCA, spoIVCA, in vitro, and SpoIIID. The results are as follows: spoIVCA writes the product E δ ^ E, and adds E δ ^ E SpoIIID to add the output data. The results showed that during the formation of subtilis cells, the DNA of subtilis was re-formed and the spoIVCA wrote "E δ ^ E" SpoIIID cycle. You are in the process of controlling the temperature. You know, you need to know that you have a problem. In addition to spoIVCA, E δ ^ E is used to write the subgroup (spoIID,spoVE). It is shown that the SpoIIID is different from each other, the SpoIIID is the same as the DNaseI, the in vitro is the one that contains the DNA fragments, the SpoIIIDspoIID, the SpoIIIDspoIID, and the DNA fragments. It is possible that the spac and spoIVCA spoolers may be used to fuse the genes on the chromosomes of the children, the reproductive period of the spoIVCA cells will be forced to detect, and the DNA will be reprogrammed to have a dead cell. The results of the experiment, DNA and DNA were then edited into direct and non-SpoIVCA factors during the cell formation period. The SpoIIID factor is the possibility that you will now analyze the possibility.