膀胱癌におけるTCF-4を介した細胞増殖伝達機構に関する検討

TCF-4介导的膀胱癌细胞增殖传导机制研究

• 批准号: 12671531
• 负责人: 椎名 浩昭
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Shimane Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12671531/
• 关键词: β-catenin; Tcf-4; 膀胱癌; cyclin D1; 細胞間増殖シグナル

【目的】膀胱癌における細胞間増殖シグナルの伝達機構に関しては完全には解明されていないのが現状で、ことにβ-cateninとともにWntシグナルを形成するTcf-4を分子生物学的に検討した報告はない。今回、β-cateninとTcf-4の異常がその標的遺伝子とされるcyclin D1の発現に及ぼす影響を検討した。【対象および方法】TUR-Btおよび膀胱全摘を施行した膀胱癌34例を対象とし、癌部と非癌部の膀胱組織からgenomic DNAおよびtotal RNAを抽出した。Genomic DNAをtemplateとして、β-cateninはexon 3を、Tcf-4はexon 9のA(9)repeatを含む領域を各々PCRにて増幅し、PCR-SSCP法にて異常を認めた場合にはdyeterminator法にて塩基配列を決定した。Total RNAよりoligo-dT primerを用いてcDNAを作成し、Tcf-4のexon 9を含む領域のsplicingの異常を検討し、cyclin D1は半定量的RT-PCR法によりmRNAの発現を解析した。【結果】β-cateninの異常は癌組織2例に認められ(TCT(S):TTT(F)およびTCT(S):TGT(C))、ともにcyclin D1の過発現(2.1AUおよび2.3AU)を認めた。Tcf-4のsplicing variantは癌組織25例に認められ、Tcf-4の異常は癌組織14例で認められた(CCC(P):ACC(T))。この14例中6例のcyclin D1 mRNAの発現(1.6±0.6AU)は、非癌部(0.4±0.5AU)に比較し有意に増加していた。【結論】膀胱癌ではβ-cateninおよびTcf-4の異常がcyclin D1の発現に関与している可能性が示唆された。

[Objective] To investigate the molecular biology of bladder cancer, the relationship between cellular proliferation and expression of Tcf-4 in bladder cancer is discussed. This paper discusses the occurrence and influence of cyclin D1 on the abnormal interaction between β-catenin and Tcf-4. TUR-Bt and total RNA were extracted from bladder cancer in 34 cases. Genomic DNA template, β-catenin, exon 3, Tcf-4, exon 9, A(9)repeat, PCR amplification, PCR-SSCP method, abnormal detection, and dydeterminer method Total RNA, oligo-dT primer, Tcf-4, exon 9, splicing abnormalities, cyclin D1, and semi-quantitative RT-PCR analysis of mRNA expression [Results] β-catenin was abnormal in 2 cases of cancer tissue (TCT(S):TTT(F):TGT(C)), and cyclin D1 was abnormal in 2 cases (2.1AU). 25 cases of Tcf-4 splicing variant were identified as cancerous tissues, 14 cases of Tcf-4 splicing variant as cancerous tissues (CCC(P):ACC(T)). Cyclin D1 mRNA expression increased significantly in 6 of the 14 cases (1.6± 0.6 AU) compared with that in non-cancerous regions (0.4± 0.5 AU). [Conclusion] Abnormality of β-catenin and Tcf-4 in bladder cancer may be related to the development of cyclin D1.