The role of the poly(A)-specific ribonuclease (PARN) in mRNA decay

聚腺苷酸特异性核糖核酸酶 (PARN) 在 mRNA 降解中的作用

基本信息

项目摘要

Degradation of the poly(A) tail (deadenylation) is the first and rate-limiting step in the decay of many mRNAs. Deadenylation is also used as a means of translational control during oocyte maturation and early development. We have purified and cloned a poly(A)-specific 3'-exoribonuclease (PARN) that is responsible for deadenylation in oocytes and possible also in somatic cells. Surprisingly, the nuclease prefers substrate RNAs carrying a 5' cap. The current application has three goals: First, overproduction of sufficient quantities of PARN in a eukaryotic system to allow a characterisation of the enzyme's functional properties, in particular cap dependence and processivity; second, the investigation of the relationship between mRNA translation and decay; and, third, the generation of a knock-out mouse to obtain definitive evidence regarding the physiological role of PARN.
poly(A)尾部的降解(deadenylation)是许多mrna衰变的第一步和限速步骤。在卵母细胞成熟和早期发育过程中,死蛋白化也被用作翻译控制的一种手段。我们纯化并克隆了一种聚(a)特异性的3'-外核糖核酸酶(PARN),该酶在卵母细胞和体细胞中可能负责死基化。令人惊讶的是,核酸酶更喜欢携带5'帽的底物rna。目前的应用有三个目标:第一,在真核系统中过量生产足够数量的PARN,以允许表征酶的功能特性,特别是帽依赖性和加工性;二是mRNA翻译与衰变关系的研究;第三,基因敲除小鼠的产生,以获得关于PARN生理作用的明确证据。

项目成果

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