Charakterisierung einer Poly(A)-spezifischen 3`-Exoribonuklease und ihrer Rolle bei der Deadenylierung von mRNA
聚腺苷酸特异性 3`-核糖核酸外切酶的表征及其在 mRNA 脱腺苷酸化中的作用
基本信息
- 批准号:5384513
- 负责人:
- 金额:--
- 依托单位:
- 依托单位国家:德国
- 项目类别:Research Grants
- 财政年份:1997
- 资助国家:德国
- 起止时间:1996-12-31 至 2000-12-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
Der Abbau des Poly(A)-Schwanzes der mRNA (Deadenylierung) ist der erste und geschwindigkeitsbestimmende Schritt im Abbau vieler mRNAs. Außerdem wird die Deadenylierung als Mittel der Translationskontrolle in der Oocytenreifung benutzt. Wir haben eine Poly(A)-spezifische 3'-Exoribonuklease gereinigt und kloniert, die möglicherweise für die Deadenylierung von mRNA in somatischen Zellen verantwortlich ist. ein homologes Enzym aus Xenopus katalysiert die Deadenylierung in Oocyten. Erstaunlicherweise bevorzugen diese 3'-Exoribonukleasen Substrate, die am 5'-Ende ein cap tragen. Hier werden Mittel beantragt, um zwei Ziele zu verfolgen. Erstens soll das Enzym in einem eukaryontischen System überproduziert werden, da das aus E. coli gewonnene Enzym sich in seinen Eigenschaften von denen des authentischen Enzyms unterscheidet. Zweitens soll eine Kartierung des Mausgens abgeschlossen werden. Mit Hilfe der dabei gewonnenen Inforamtion soll ein Plasmid zur Herstellung einer knock-out-Maus konstruiert werden.
多聚(A)-Schwanzes(Deadenylierung)mRNA的检测是检测多种mRNAs的第一步和第二步。在Oocytenreifung benutzt中,Deadenylierung als Mittel der Translationskontrolle。我们有一种Poly(A)-特异性的3 '-Exoribonuklease geneinigt and kloniert,这种möglicherweise für die Deadenylierung von mRNA in somatischen Zellen verantwortlich ist。非洲爪蟾卵母细胞中的一种同源酶。首先,我们将3 '-外核糖核酸底物,在5'-端盖上一个盖子。这里的韦尔登米特尔很漂亮,两个人都很漂亮。因此,在一个真核生物系统中,酶的生产必须从E.大肠杆菌中的一种酶,其特征在于它是一种真正的酶。两个人都有一个画满了韦尔登的画。我帮助病人获得了一个质粒的基因敲除信息--韦尔登。
项目成果
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