Establishment of Cell Strains Deficient in Genes Related to Mutation Induction, and Analysis of Mutation Mechanisms Using the Cell Strains.
建立缺失突变诱导相关基因的细胞株,并利用该细胞株分析突变机制。
基本信息
- 批准号:12680542
- 负责人:
- 金额:$ 2.5万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
- 财政年份:2000
- 资助国家:日本
- 起止时间:2000 至 2001
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
Recently, several kinds of DNA polymerases have been found in Eschericnia coil and mammalian cells. The first purpose of this study is to elucidate roles of these DNA polymerases on mutation induction and DNA damage avoidance. The second purpose of this study is to investigate the types of base changes arisen from specific base damage by these DNA polymerases.We cloned DNA polymerase ζ(Rev3) cDNA from chicken DT40 cells, and established hprpt (+/-) heterozygous cell, lines by the somatic recombination method to utilize mutation assay. We also established a DT40 cell line deficient in xeroderma pigmentosum A (XPA) gene, and comfirmed UV hypersensitivity of the cell line.We constructed the plasmid containing one 3-nitrobenzanthrone (NBA) adduct on a guanine base of the plasmid and rendered the plasmid to replicate in E. coil. We found that an adenine is inserted at the opposite site of the guanine having a NBA adduct. We found that bydroquinone, a metabolite of benzene, produces reactive oxygene species in the presence of NADH and copper ions, and causes G : C →A : T transition mutations in mammalian cells.These results clarified a part of the pathway leading to base changes from DNA damage, and provided the advance toward the clarification of complete mutation mechanisms.
近年来,在大肠杆菌和哺乳动物细胞中发现了几种DNA聚合酶。本研究的第一个目的是阐明这些DNA聚合酶在突变诱导和DNA损伤避免中的作用。本研究从鸡DT 40细胞中克隆了DNA聚合酶Rev 3的cDNA,并利用体细胞重组技术建立了hprpt(+/-)杂合子细胞系,利用突变检测技术对该杂合子细胞系进行了检测。我们还建立了着色性干皮病A(xeroderma pigmentosum A,XPA)基因缺陷的DT 40细胞系,并证实了该细胞系对紫外线的敏感性。线圈我们发现,腺嘌呤被插入在具有NBA加合物的鸟嘌呤的相反位点。我们发现苯的代谢产物氢醌在NADH和铜离子存在下产生活性氧,引起哺乳动物细胞G:C →A:T突变,这些结果阐明了DNA损伤导致碱基变化的部分途径,为阐明完整的突变机制提供了新的线索。
项目成果
期刊论文数量(22)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Aki Nakayama: "Risk Evaluation for Chromosome Aberrations Induced by Benzene Metabolites."Radial. Biol. Res. Commun.. 36 (2). 120-135 (2000)
Aki Nakayama:“苯代谢物引起的染色体畸变的风险评估”。径向。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Nakayama Aki: "Comparison of the mutations induced by p-benzoquinone, a benzene metabolite, in human and mouse cells"Mutation Research. 470. 147-153 (2000)
Nakayama Aki:“苯代谢物对苯醌在人和小鼠细胞中诱导突变的比较”突变研究。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
八木孝司: "DT40細胞株で致死的変異を導入したコンディショナルミュータントをつくる"実験医学. 18. 67-73 (2000)
Takashi Yagi:“创建在 DT40 细胞系中引入致死突变的条件突变体”实验医学 18. 67-73 (2000)。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
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Otoshi Eriko:“环丁烷嘧啶二聚体、(6-4)光产物和次要光产物在修复缺陷型着色性干皮病 A 细胞的紫外线诱变中的各自作用”癌症研究。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
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Takashi Yagi:“特写实验方法完整版”Bunmei Kasai 213(2002)。
- DOI:
- 发表时间:
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- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
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