Rev蛋白核外移行阻害を標的とする天然由来抗エイズリード化合物の探索

寻找天然来源的抗艾滋病先导化合物，以抑制 Rev 蛋白核输出为目标

• 批准号: 13015212
• 负责人: 村上 啓寿
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13015212/
• 关键词: 核外移行シグナル; 核外移行阻害活性; Rev蛋白; valtrate; 1'-acetoxylchavicol acetate; 抗エイズ薬; HIV; CRM1

ヒト免疫不全ウィルス(human immunodeficiency virus)のRev蛋白質は、分子内に存在する特異的アミノ酸配列である核外移行シグナル(NES)と受容体蛋白質CRM1との結合により、核外へと移行されウィルスの複製に利用される。本研究では、これまで抗エイズ薬の標的としてはほとんど検討されていなかったRev蛋白に焦点を当て、その核外移行阻害を標的とした天然物由来の新しい抗エイズリード化合物の探索を検討した。まず、Rev蛋白の核外移行シグナル(NES)と蛍光蛋白(GFP)との融合蛋白質を発現させた分裂酵母を用いた極めて簡便な蛋白質外移行阻害活性を検定するアッセイ系を構築した。そして、本アッセイ系を用いて生薬類および東南アジア薬用植物の数百にも及ぶ抽出エキスから新規活性物質の探索を検討し、著者がすでに見出しているRev蛋白核外移行阻害活性物質callystatin Aとは大きく化学構造上の特徴が異なる新規Rev蛋白核外移行阻害活性成分valtrateならびに1'-acetoxychavicol acetateを生薬カノコソウならびにタイ産薬用植物"Kaa"からそれぞれ単離、構造決定することに成功した。また、これらのRev蛋白核外移行阻害成分は、感染細胞に障害性を示さない濃度でエイズウィルスの構造蛋白p24の産生を有意に抑制することを明らかにした。さらに、今回見出した新規Rev蛋白核外移行阻害成分の作用機序をcallystatin Aと比較解析するためのビオチン標識したプローブ分子の創製にも成功するとともに、両成分ともCRM1の529番目のシステイン残基と結合することにより、Rev蛋白の核外移行を抑制することを証明した。

The Rev protein of human immunodeficiency virus (human immunodeficiency virus) has a specific nucleotide sequence that exists in the molecule. It is used for the binding of receptor protein CRM1 to extracellular migration (NES). This study is aimed at exploring the origin of novel anti-nuclear compounds in the presence of anti-nuclear proteins. Construction of fusion protein systems for the development of extracellular migration inhibitors (NES) and GFP proteins and for the determination of protein migration inhibition activity in yeast. The research on the new active substances in the field of bio-active substances and the extraction of bio-active substances from hundreds of bio-active plants in Southeast China Rev protein extra-nuclear migration inhibition active substance calstatin A and its chemical structure are different from each other. Rev protein extra-nuclear migration inhibition active ingredient valtrate and 1'-acetoxychavicol acetate are used for production of drugs. The structure determines success. The expression level of the extracellular migration inhibiting component of Rev protein was found to inhibit the production of structural protein p24 in infected cells In addition, the successful creation of a new protein molecule that uses callistatin A and a comparative analysis of the action mechanism of the extracellular migration inhibiting component of Rev protein and the protein marker has been proved to inhibit the extracellular migration of Rev protein by binding to the 529-position sistatin residue of CRM1.

项目成果

N.Murakami et al.: "Synthesis of stable analogs in blood and conformational analysis of arenastatin A, a potent cytotoxic spongean depsipeptide"Tetrahedron. 57(19). 4323-4336 (2001)

N.Murakami 等人：“血液中稳定类似物的合成和阿那他汀 A（一种有效的细胞毒性海绵缩酚肽）的构象分析”四面体。

N.Murakami et al.: "New readily accessible peroxides with high anti-malarial potency"Bioorg. &Med. Chem. Lett.. 12(1). 69-72 (2002)

N.Murakami 等人：“具有高抗疟功效的易于获得的新型过氧化物”Bioorg。

N.Murakami et al.: "Total synthesis of agosterol A, an MDR-modulator from a marine sponge"Chem. Eur. j.. 7(12). 2663-2670 (2001)

N.Murakami 等人：“来自海绵的 MDR 调节剂阿戈甾醇 A 的全合成”Chem.

N.Murakami et al.: "Participation of the β-hydroxyketone part for potent cytotoxicity of callystatin A, a spongean polyketide"Bioorg.Med.Chem. 9(1). 57-67 (2001)

N.Murakami 等：“β-羟基酮部分参与海绵聚酮化合物的有效细胞毒性”Bioorg.Med.Chem. 57-67 (2001)。

N.Murakami et al.: "New anti-malarial flavonol glycoside from Hydrangeae Dulcis Folium"Bioorg.& Med.Chem.Lett.. 11(19). 2445-2447 (2001)

N.Murakami 等人：“来自绣球花的新型抗疟疾黄酮醇糖苷”Bioorg。