CXCR4マンタゴニスト耐性HIV変異株に関する研究

CXCR4拮抗剂耐药HIV突变体的研究

• 批准号: 13015219
• 负责人: 中島 秀喜
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: St. Marianna University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13015219/
• 关键词: T134; T140; AMD3100; 薬剤耐性HIV-1; CXCR4アンタゴニスト; SDF-1; ウイルス侵入阻害薬; T20

1)T134耐性HIV-1の作成:HIV-1NL4-3をMT-4細胞に感染させ、MTT-4法におけるEC50に相当する濃度のT134から始めて、漸次濃度を増量しながら新しいMT-4細胞を加えて継続培養した。その結果、約145代継代した時には420nMのT134を加えても複製可能な耐性ウイルスをた。同様の方法で、AMD3100耐性ウイルスも作成した。得られたAMD3100耐性ウイルスはAMD3100とSDF-1に対して低感受性となっていたが、T134、140、ALX40-4Cに対しては感受性があった。しかしT134耐性ウイルスは、SDF-1を含め試験した全てのCXCR4アンタゴニストに対して低感受性となっていた。2)AMD3100に対して高度抵抗性となったHIV-1は、試験した全てのCXCR4アンタゴニストにもSDF-1にも抵抗性となっていた。また、T20耐性HIV-1は、CXCR4アンタゴニストには感受性が保たれていた。3)耐性ウイルスのアミノ酸変異:T134耐性HIVに見られたenv領域のアミノ酸変異を検討した。また、文献に報告されているSDF-1およびAMD3100耐性ウイルに見られた同領域のアミノ酸変異との比較を行った。その結果、T134耐性ウイルスのV3領域には、N269K、Q278T、R279K、A284V、F285L、V286Y、I288T、K290E、N293D、M294I、Q296Kの変異と290Tの挿入および274S、275Iの欠損がみられた。このことは、SDF-1やAMD3100耐性変異でみられる、N269、Q278、I288、N293の変異を含むのみならず、T134耐性ウイルスにみられたV3領域のアミノ酸変異はさらにそれ以上の多くの変異が起きていたことを意味した。また、T134耐性HIVはV1、V2、V4領域にも多くのアミノ酸変異がみられた。4)耐性ウイルスのコレセプター利用:T134耐性ウイルスのenv領域には多くのアミノ酸変異がみられたことから、この耐性ウイルスのコレセプター利用が変わったのではないかと考えた。それ故、この耐性ウイルスがCXCR4をコレセプターとして利用しているのかを、COS-7.CD4.CXCR4細胞とCOS-7.CD4.CCR5細胞を用いて検討した結果、T134耐性ウイルスは野生株ウイルス同様にCXCR4を利用していた。また、高度AMD3100耐性ウイルスのgp120領域のアミノ酸変異は、軽度耐性のそれより多く見られた。

1)T134-resistant HIV-1 production:HIV-1 NL4 -3 and MT-4 cells infected with MTT-4 assay, EC50 and T134 concentrations increased gradually, and new MT-4 cells were cultured. The results showed that at about 145 generations, T134 was 420nM, and the replication resistance was increased. The same method, AMD3100 resistance to it. AMD3100 is resistant to SDF-1 and has low susceptibility to T134, 140 and ALX40-4C. T134 is resistant to SDF-1 and CXCR-4 is resistant to SDF-1 and CXCR-4 is resistant to SDF-1. 2) AMD3100 is highly resistant to HIV-1, and CXCR4 is highly resistant to SDF-1. T20 is resistant to HIV-1 and CXCR4 is susceptible to HIV-1. 3)Resistance to HIV:T134 Resistance to HIV: Resistance to HIV:T134 Resistance to HIV In addition, the SDF-1 and AMD3100 resistance in the literature were compared. The results show that T134 is resistant to damage in the V3 domain, N269K, Q278T, R279K, A284V, F285L, V286Y, I288T, K290E, N293D, M294I, Q296K and 290T. The differences in tolerance between SDF-1 and AMD3100 include: N269, Q278, I288, N293, T134, V3, etc. T134-resistant HIV is resistant to HIV in the V1, V2, and V4 domains. 4)Tolerance:T134 Tolerance: Env: Env Therefore, CXCR4 cells were used in the study of COS-7.CD4.CCR5 cells, and CXCR4 cells were used in the study of T134 cells High AMD3100 resistance, high resistance

项目成果

Tamamura, H., Omagari, A., Nakashima, H., et al.: "Development of specific CXCR4 inhibitors possessing high selectivity index as well as complete stability in serum based on an anti-HIV peptide T140"Bioorganic Med. Chemist. Lett.. 11. 1897-1902 (2001)

Tamamura, H.、Omagari, A.、Nakashima, H. 等人：“基于抗 HIV 肽 T140 开发具有高选择性指数以及血清中完全稳定性的特异性 CXCR4 抑制剂”Bioorganic Med。

Ueki, M., Watanabe, S., Nakashima, H., et al.: "Synthesis and chain length --anti-HIV activity relationship of fully N-and O-sulfated homooligomers of Tyrosine"Bioorganic Med. Chemist.. 9. 487-492 (2001)

Ueki, M.、Watanabe, S.、Nakashima, H.等人：“酪氨酸完全N-和O-硫酸化均聚物的合成和链长-抗HIV活性关系”Bioorganic Med。

Kanbara, K., Sato, S., Tamamura, H., Nakashima, H., et al.: "Biological and genetic characterization of a human immunodeficiency virus srain resistant to CXCR4 antagonist T134"AIDS Res. Human Retroviruses. 17. 615-622 (2001)

Kanbara, K.、Sato, S.、Tamamura, H.、Nakashima, H. 等人：“对 CXCR4 拮抗剂 T134 具有抗性的人类免疫缺陷病毒株的生物学和遗传特征”AIDS Res。

Kannamoto, T., Kashiwada, Y., Nakashima, H., et al.: "Anti-human immunodeficiency virus activity of YK-FH312, a betulinic acid derivative; a novel compound blocking viral maturation"Antimicrob. Agents Chemother.. 45. 1225-1230 (2001)

Kannamoto, T.、Kashiwada, Y.、Nakashima, H.等人：“YK-FH312（一种桦木酸衍生物）的抗人类免疫缺陷病毒活性；一种阻断病毒成熟的新型化合物”Antimicrob。

Chiba, H., Inokoshi, J., Nakashima, H., et al.: "Actinohivin, a novel anti-HIV protein from an actinomycete that inhibits syncytium formation : isolation, characterization, and biological activities"Biochem. Biophysic. Res. Commun.. 282. 595-601 (2001)

Chiba, H.、Inokoshi, J.、Nakashima, H. 等人：“Actinohivin，一种来自放线菌的新型抗 HIV 蛋白，可抑制合胞体形成：分离、表征和生物活性”Biochem。