抗CCR5リボザイムの誘導発現系の開発とそれによるHIV感染のon-off制御

抗CCR5核酶诱导表达系统的开发及其对HIV感染的开关控制

• 批准号: 13015227
• 负责人: 武部 豊
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: National Institute of Infectious Diseases
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13015227/
• 关键词: リボザイム; CCR5; テトラサイクリン遺伝子; on-off制御; レトロウイルスベクター

HIV-1の主要なコレセプターであるCCR5に対するon-off制御可能なリボザイム発現ベクターの開発を行った。on-off制御のためにテトラサイクリン(Tc)遺伝子オペレーター配列をヒトtRNA遺伝子の直上流の様々な位置に挿入し,テトラサイクリンの存在,非存在下で至適の制御が得られる条件を見い出し,さらに種々の細胞への高能率の遺伝子導入を可能にするようレトロウイルスベクターに挿入した。抗CCR5リボザイムをon-off制御可能なレトロウイルスベクターをヒト細胞PM1に感染させ,リボザイムRNAおよびCCR5発現量をモニターした。その結果,Tc添加物後リボザイムの速やかな転写誘導が観察され,4時間程度でバックグラウンドレベルの15-20倍に達した。CCR5発現はTc添加後3日以降に顕著な減少が見られ7日目には90%以上の減少が見られた。この効果はCCR5に特異的でCD4,CXCR4には何ら影響を与えなかった。R5使用ウイルス(AD8株)の感染(m,o,i=0,1)を約90%程度抑制することを示した。

The main purpose of HIV-1 is to make sure that the CCR5 is responsible for the management of on-off. The on-off system is used to control the transmission efficiency (Tc). The configuration of the tRNA device is directly upstream. The location of the device is loaded, and it exists. If there is no such device, it is necessary to obtain the output condition of the device, and the high energy rate subsystem of the system may be used. Anti-CCR5 anti-PM1 control system may be sensitive to cellular PM1 infection, and may be sensitive to cellular PM1 infection, RNA, CCR5, and dose. The results showed that after the addition of Tc, the speed response guide for inspection was 15-20 times higher than that of 15-20 times for 4 times. CCR5 said that 3 days after the addition of Tc, there was a decrease in the number of people who saw more than 90 percent of the total number of people in the 7th day. What is the difference between the CCR5 and the special CD4,CXCR4? R5 was infected with AD8 strain and inhibited the infection by about 90% of the time.