造血幹細胞による肝再生補完機構の解明

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(1)Hoechst 33342色素を用いて細胞周期アッセイを行うとG0/G1よりもさらに暗い部分にHoechst陰性の細胞集団(Side Population細胞)が観察され、骨髄ではSP細胞の中に最も未熟な幹細胞が存在することが示されている。最近、SP細胞の表現型はATP binding cassette transporter Bcrp1/ABCG2分子によって色素が細胞内から汲み出される性質に拠ることが報告された。そこで、oval細胞にBcrp1が発現しているのかどうか検討するためにラットのBcrp1 cDNAを単離した。2-アセチルアミノフルオレン投与と部分肝切除を行ないoval細胞の発生を促すと、Northern blot法により肝臓におけるBcrp1 mRNAの発現はoval細胞の出現とともに上昇することがわかった。in situ hybridization法を行うと、Bcrp1の発現はoval細胞に一致していた。肝幹細胞や肝臓に生着した造血幹細胞に起源を発する多分化能細胞を単離するための方法としてSP細胞の表現型は有用であることが示唆された。(2)ubiquitousにgreen fluorescent protein(GFP)が発現すると考えられているchicken β-actin promoter-GFPトランスジェニック(Tg)マウス[C57BL/6-TgN(act-EGFP)Osb1]の骨髄細胞をc-kitミュータント・W/W^vマウスに移植し、その肝臓におけるGFP陽性細胞の出現と分布を病理組織学的にしらべた。骨髄移植1ヶ月後の肝組織ではグリソン氏鞘周囲にGFP陽性細胞が出現し、四塩化炭素や抗Fas抗体を投与することにより肝障害を促すと類洞に沿ってGFP陽性細胞が観察された。骨髄細胞の中には類洞内皮細胞へ分化できる能力をもつ細胞が存在する可能性がある。