マスト細胞腫の発生におけるKITレセプターの役割

KIT受体在肥大细胞肿瘤发展中的作用

基本信息

批准号：
06770156
负责人：
辻村亨
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770156/
关键词：
マスト細胞腫マスト細胞性白血病 c-kit遺伝子突然変異

项目摘要

c-kit遺伝子はKITレセプター・チロシンキナーゼをコードし、そのリガンドであるstem cell factor(SCF)はマスト細胞の最も重要な増殖因子である。正常のKITはSCFが結合すると自らを燐酸化することによりシグナル伝達の第一歩をふみ出す。マウス、ラット、ヒトのマスト細胞はSCFだけの刺激で増殖するがマスト細胞の腫瘍化にSCF-KITによるシグナル伝達で関与しているか明らかでない。本研究により、我々はマウスのマスト細胞腫細胞株(P-815)、ラットのマスト細胞性白血病細胞株(RBL-2H3)、ヒトのマスト細胞性白血病細胞株(HMC-1)の細胞ではSCFの結合がなくてもKITのチロシン残基が燐酸化しておりキナーゼが活性化していることを見い出した。しかしいずれの細胞においてもSCF mRNAは検出できなかったのでこの構成的な活性化にautocrine機構は関与していないと考えられた。c-kit遺伝子の塩基配列を調べたところ、いずれの細胞でもキナーゼ領域の同一のアスパラギン酸をコードするコドンに点突然変異が存在しその結果アスパラギン酸がチロシンあるいはバリンへ置換することが明らかになった。培養ヒト腎細胞株(293T)でそれぞれの変異型c-kit遺伝子を発現させて得られた変異型KITでも構成的にチロシン残基の燐酸化とキナーゼの活性化がみられた。以上より構成的なKITの活性化の原因はアスパラギン酸が置換される点突然変異に求められKITレセプターには"gain-of-function"突然変異が存在することが明らかとなった。突然変異によるKITの構成的な活性化がマスト細胞の腫瘍化に関与している可能性が示唆された。

C-KIT基因编码试剂盒受体酪氨酸激酶及其配体干细胞因子（SCF）是肥大细胞最重要的生长因子。正常试剂盒在SCF结合后通过磷酸化本身迈出了信号传导的第一步。小鼠，大鼠和人类的质量细胞单独生长，但尚不清楚它们是否参与肥大细胞肿瘤发生中的SCF-KIT信号传导。在这项研究中，我们发现，在小鼠肥大细胞瘤细胞系（P-815）的细胞中，大鼠肥大细胞生成白血病细胞系（RBL-2H3）和人类肥大性白血病细胞系（HMC-1），均具有磷酸化和动力学的磷酸化症状。但是，由于在任何一个细胞中都无法检测到SCF mRNA，因此认为自分泌机制与这种本构激活有关。检查了C-KIT基因的核苷酸序列，并揭示了在所有细胞中编码相同天冬氨酸区域的白天然天冬氨酸中存在点突变，从而导致用酪氨酸或瓦琳代替天冬氨酸。通过在培养的人肾细胞系中表达每个突变的C-KIT基因获得的突变试剂盒（293T）显示出酪氨酸残基的组成型磷酸化和激酶的激活。从上面可以揭示出试剂盒激活的构成原因由替代天冬氨酸取代的点突变确定，并且在试剂盒受体中存在“功能获得”突变。有人提出，突变可能与肥大细胞肿瘤发生有关试剂盒的组成型激活。