高等植物の分化成長における二成分制御系シグナル伝達因子の機能解析

高等植物分化生长中二元调控系统信号因子的功能分析

基本信息

批准号：
13017208
负责人：
上口智治
金额：
$ 1.92万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.サイトカイニン受容体遺伝子群の機能解析シュート部位で発現しているサイトカイニンレセプターの候補であるAHK2,3がいかなる部位で発現しているのかを組織及び細胞レベルで解析するために、AHK2,3とGUSならびにGFPの融合タンパク質を構築したしAHK3-GFP融合体の観察では、GFP活性は根・胚軸・子葉や本葉で認められる。根や胚軸においてはコルメラ細胞群や維管束で、若い本葉では特に葉縁部で、成熟葉では葉脈で発現しているものと考えられる。またGFPの蛍光は細胞の外縁を取り巻くように認められ、AHK3が細胞質膜に局在するという予測と一致する。AHK2,3両遺伝子のT-DNA挿入変異体の検索を行い、AHK2遺伝子については1ラインの、AHK3遺伝子については2ラインの挿入変異体を同定できた。AHK3変異体の二つのラインについてはホモ接合体を確立でき、胚軸から調整したカルスはサイトカイニンに対する感受性が低下していることを見出した。2.TCP遺伝子群の機能解析サイトカイニンシグナル伝達に関与することが想定されているAHP遺伝子群(二成分制御系の信号仲介因子であるHPt因子をコードする)と物理的相互作用が可能な因子として、TCPドメインを持つ新規転写関連因子を見出し、TCP10と名付けた。この遺伝子のT-DNA挿入変異体は植物体のシュート部位において顕著な矮性を示すことを見出した。TCP10遺伝子の過剰生産体はそれとは逆に葉柄や胚軸が伸長する。さらにTCP10プロモーターとGUSの融合体を用いて発現部位の詳細な解析を行い、TCP10の発現は胚軸・本葉・花の花柱で認められ、花茎を除くと表現型が現れる部位との間には相関があることが判明した。

1。对细胞分裂素受体基因的功能分析，分析在组织和细胞水平上，其中构建了在芽位位点表达的候选细胞分裂素受体AHK2,3，构建了AHK2,3，GUS和GFP的融合蛋白。当观察AHK3-GFP融合时，在根，下胚层，子叶和真实叶子中发现GFP活性。人们认为它在根和下胚轴中表达为Cormera细胞和血管束，以及年轻的，真正的叶子，尤其是在叶边缘和成熟的叶片中，在静脉中。另外，观察到细胞外边缘周围观察到GFP荧光，这与AHK3位于细胞质膜的预测一致。我们搜索了T-DNA插入突变体的AHK2和3个基因，并确定了AHK2基因的1系插入突变体和AHK3基因的2系插入突变体。建立了针对AHK3突变体的两条线的纯合体，发现从低邻苯而调节的愈伤组织对细胞分裂素的敏感性降低。 2。对TCP基因组的功能分析，我们发现了一个与TCP结构域的新型转录相关因子，是可以与AHP基因组物理相互作用的因子（编码HPT因子，这是两组分量调节系统的信号介导的因子），预计该因子与细胞分裂素信号传导和命名为TCP10有关。发现该基因的T-DNA插入突变体在植物射击部位表现出明显的矮小。相反，TCP10基因的过度生产会导致叶柄和下胚轴延伸。此外，使用TCP10启动子和GUS的融合进行了对表达位点的详细分析，发现在低胚基，真实叶子和花样中观察到TCP10表达，并且在排除花茎时出现的表型之间存在相关性。