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大腸菌定常期特異的シグマ因子の発現/活性制御機構の解析

大肠杆菌稳定期特异性西格玛因子表达/活性控制机制分析

基本信息

批准号：
08680738
负责人：
上口智治
金额：
$ 1.66万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

I.定常期特異的シグマ因子の発現制御機構の解析1)δSの発現に関わる正の制御因子を検索する目的で、δSが脱抑制されるhns変異株中でもその発現が低下するような変異株を分離した。sirA(sigma S regulation)と名付けたこの変異株中では、δSの転写や翻訳効率には変化がないものの、産物が不安定化することでその発現量に異常が生じたものであることを明らかにした。変異のマッピングとクローン化により、sirA遺伝子をクローン化した。しかしhns変異を含まない野生型大腸菌にsirA変異を導入したところ、δSの発現には顕著な異常は観察されず、δS発現におけるsirA変異の影響はhns変異株という特殊な遺伝子型に限って現れる現象であると結論できる。ところでsirAの欠失変異を新たに構築したところ、その変異株はrich medium sensitivityと細胞の異常な伸長という表現型を示した。このことはSirAは本来細胞分裂に関係する機能を持つ蛋白質であることを示唆する。2)エネルギー代謝における中間産物であるアセチルリン酸がδSの発現調節において負の制御因子であることを示唆するデータを得た。δS発現の負の制御因子として、最近二成分制御系のレギュレーターであるRssBが同定されている。アセチルリン酸は他のレギュレーター蛋白質をリン酸化しうる低分子であることを考慮すると、アセチルリン酸がRssBの制御因子として機能する可能性が考えられ、現在解析中である。II.グローバルリプレッサーH-NSの機能ドメインの解析グローバルな転写抑制因子であるH-NSの作用メカニズム解明のため、変異解析による機能ドメインの解析を行った。H-NS制御下にあるプロモーターの転写を指標として多数のhns変異株を取得し、遺伝学的・生化学的解析を行い、H-NSのN末端・中央部・C末端領域に転写抑制・オリゴマー化・DNA結合ドメインがそれぞれ局在することを立証した。

I. Analysis of the Regulators for the Growth of Steady-stage Specific Factors 1) The Regulators for the Growth of δS are Related to the Growth of δ S and the Growth of δS is Low in Heterosis Plants. sirA(sigma S regulation) is a variable in the output of a plant, and the output of a plant is unstable. The difference between the two is that they are different. The results show that the sirA variation in wild type E. coli is introduced into the wild type E. coli, and the delta S variation occurs in the wild type E. coli. The sirA variation in wild type E. coli is introduced into the wild type E. coli. The expression of abnormal medium sensitivity in cells is shown in the following ways: SirA is a functional protein that supports cell division. 2) The intermediate product of the metabolism is the negative control factor. The negative control factor of δS occurrence is changed, and the negative control factor of RssB is changed in the nearest binary control system. The possibility of regulating the function of RssB in the presence of RssB is considered. II. Analysis of functional parameters of H-NS. Analysis of functional parameters of H-NS. Analysis of functional parameters of H-NS. H-NS control under the control of the target, most of the hns variant plant acquisition, genetic analysis, biochemical analysis, H-NS N-terminal, central, C-terminal domain of the write inhibition, transformation, DNA binding, and other aspects of the evidence