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配位結合をトリガーとした自己組織化半合成酵素の活性スイッチ法の開発

配位結合をトリガーとした自己組織化半合成酵素の活性スイッチ法の開発
开发一种使用配位键作为触发器来切换自组装半合成酶活性的方法
批准号：
13031064
负责人：
浜地 格
金额：
$1.15万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2001 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13031064/
关键词：
リボヌクレアーゼ半合成酵素非天然アミノ酸オン・オフスイッチ極性転換

项目摘要

项目成果

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英文摘要
S-ペプチドはαヘリックス構造を取ることが既知なので、まずこのヘリックスの極性残基を一つだけIda4に入れ替えたSペプチドをS-プロテインと複合化した。これらの変異体の鉄イオン添加に対する応答挙動を反応初速度から見積もると、Ida4の置換位置の電荷(Glu, ASPかLys, Argかの違い)によって金属イオンによる応答挙動は全く逆になった。即ち本来Lys, Argであった部位のIda4への置換は、鉄イオン添加によって活性が増幅するが、Glu, Aspの入れ替えは鉄イオンによって活性が減少した。蛋白質骨格中に組み込まれたIda4は、中性条件ではマイナス1であるが、3価の鉄イオンを錯化するとプラス1となる。このような電荷の反転が上記のような対照的な挙動の一因と考えられた。より大きな活性変化は二置換体で見られた。6,9-Ida4と7,10-Ida4では全く反対の応答特性であった。速度論解析を行うとこの変化はkcatに依存するものであり、7,10-Ida4では鉄イオンの存在によってkcatにして20倍以上のオンオフ制御が起こった。CDスペクトルで構造変化を評価すると、鉄イオンの錯化によってαヘリックス構造がわずかに巻き戻っていることが示された。このような局所的なヘリックス構造のゲスト誘導的な巻き戻りが活性のオンオフと相関しているようである。
期刊论文(2)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
I.Hamachi et al.: "Solid-phase Lipid Synthesis (SPLS)-2:Incidental Discovery of Organogelators Based on Artificial Glycolipids"Tetrahedron Letters. 6141-6145 (2001)
I.Hamachi 等人：“固相脂质合成（SPLS）-2：基于人工糖脂的有机凝胶剂的偶然发现”四面体快报。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
I.Hamachi et al.: "Pd(en) as a Sequence-Selective Molecular Pinch for -Helical Peptides"Chemistry Letters. 16-17 (2001)
I.Hamachi 等人：“Pd(en) 作为螺旋肽的序列选择性分子箍缩”化学快报。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Development of organic chemistry targeting biomolecules in live animals
  • 批准号：
    23H05405
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Specially Promoted Research
  • 资助金额：
    $389.79万
  • 财政年份：
    2023
  • 负责人：
    浜地 格
  • 依托单位：
    Kyoto University
リガンド指向性化学の展開と新しい共有結合型阻害剤の開発
  • 批准号：
    22F31791
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 资助金额：
    $1.47万
  • 财政年份：
    2022
  • 负责人：
    浜地 格
  • 依托单位：
    Kyoto University
リガンド指向性化学の展開と新しい共有結合型阻害剤の開発
  • 批准号：
    22F21791
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 资助金额：
    $1.47万
  • 财政年份：
    2022
  • 负责人：
    浜地 格
  • 依托单位：
    Kyoto University
生細胞表層工学の新手法の開発と応用
  • 批准号：
    21F21701
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 资助金额：
    $1.47万
  • 财政年份：
    2021
  • 负责人：
    浜地 格
  • 依托单位：
    Kyoto University