マウスPtc突然変異体の発生遺伝学

小鼠 Ptc 突变体的发育遗传学

• 批准号: 13045050
• 负责人: 城石 俊彦
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: National Institute of Genetics
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13045050/
• 关键词: Shh; Ptc; 形態形成

Shhタンパクは、形態形成に重要な働きをする分泌性のシグナル分子である。本研究では、ptc遺伝子のhypomorphなアリルであるmes変異体を用い、胎生後期におけるptcの機能解析を行う。Mes変異とptcノックアウトアリルとのコンパウンドヘテロ個体(ptc^~/ptc^<mes>)における肺の形態を発生の段階を追って調べた。その結果、発生中期(〜E15)までは肺の形態に大きな異常は見られなかったが、E16でわずかに、そしてE17、E18とより重度な間葉細胞の過増殖が観察された。一方、将来肺胞を形成する上皮性内胚葉細胞には、大きな増殖異常は観察されなかった。また、肺の発生期に細気管支の先端部や基部で部位特異的に発現する遺伝子(SP-C、CC-10)の発現を調べたところ、これらの遺伝子の発現領域に異常は見られなかった。よって、ptc^~/ptc^<mes>胚における間葉細胞の過増殖は、基部-先端部軸形成異常による2次的な影響でない事が明らかとなった。以上の結果より、mes突然変異によって失われたptcのC末端ドメインは、肺の基部-先端部軸形成には必須ではないが、発生後期に間葉細胞の増殖抑制に関与していることが明らかとなった。ptc^~/ptc^<mes>胚における神経管背腹軸形成を調べるため、神経管の特定に位置に形成される神経細胞のマーカー遺伝子の発現領域を解析した。その結果、ptc^~/ptc^<mes>胚において、高濃度のShhによって誘導されるNkx2.2だけでなく、中濃度のShhによって誘導されるNkx6.1の発現領域にも異常は見られなかった。さらに、神経管背側で発現し低濃度のShhによって抑制されるPax3の発現領域にも異常は観察されなかった。よって、PtcのC末端ドメインは、神経管の背腹軸決定に必須ではないことが明らかとなった。以上の結果をまとめると、ヘッジホグシグナル伝達系は、PtcのC末端ドメインを必要とする間葉細胞の増殖調節に関与する系と、必要としない神経管背腹軸形成に関与する系の2つに分岐している可能性が示唆された。

Shhタ パ パ パ である, morphologically forming に, important な な をする をする, secretory <s:1> シグナ である molecules である. This study で は, PTC but 伝 の hypomorph な ア リ ル で あ る mes - variant を い, viviparous late に お け る PTC の function analytical う を line. Mes - different と PTC ノ ッ ク ア ウ ト ア リ ル と の コ ン パ ウ ン ド ヘ テ ロ individuals (PTC ^ ~ / PTC ^ < Mes >) に お け る lung の form を 発 raw の Duan Jie を chase っ て adjustable べ た. そ の results, 発 medium-term (~ E15) ま で は lung に の form large き な abnormal は see ら れ な か っ た が, E16 で わ ず か に, そ し て E17, E18 と よ り severe な mesenchymal の had raised colonization が 観 examine さ れ た. One side: In the future, the lung cells を form する epithelial endodermal cells に, and there is an abnormal large <s:1> な proliferation されな 観 and されな されな った. ま た, lung の 発 stage に fine 気 の tube branch apex department や base で site specific に 発 now す る heritage 伝 child (SP - C, CC - 10) の 発 now を adjustable べ た と こ ろ, こ れ ら の posthumous son 伝 の 発 fields に abnormal は see ら れ な か っ た. よ っ て, PTC ^ ~ / PTC ^ < mes > embryo に お け る mesenchymal の は rights colonization, base - the apex of the formation of an anomalous axis に よ る twice な affect で な い matter が Ming ら か と な っ た. の above results よ り, mes suddenly - different に よ っ て lost わ れ た PTC の C terminal ド メ イ ン は, の base, apex of shaft form に は must で は な い が, 発 born late に mesenchymal の raised colonization inhibit に masato and し て い る こ と が Ming ら か と な っ た. PTC ^ ~ / PTC ^ < mes > embryo に お け る god 経 tube shaft form を adjustable back an abdomen べ る た め, god 経 の に specific location に さ れ る god 経 cells の マ ー カ ー posthumous son 伝 の 発 fields を parsing し た. そ の results, PTC ^ ~ / PTC ^ < mes > embryo に お い て, high concentration の Shh に よ っ て induced さ れ る Nkx2.2 だ け で な く, concentration of の Shh に よ っ て induced さ れ る Nkx6.1 の 発 fields に も abnormal は see ら れ な か っ た. さ ら に, god 経 dorsal で 発 now し low concentration の Shh に よ っ て inhibit さ れ る Pax3 の 発 fields に も abnormal は 観 examine さ れ な か っ た. Youdaoplaceholder0, the c-terminal of the Ptc <s:1> ドメ ドメ <s:1> となった, and the <s:1> dorsal and ventral axes of the neurotransmitter determine that に must で で な な とが とが とが and ら とが be clear. の above results を ま と め る と, ヘ ッ ジ ホ グ シ グ ナ ル 伝 da は, Ptc の C terminal ド メ イ ン を necessary と す る mesenchymal の raised colonization adjust に masato and す る と, necessary と し な い god 経 tube shaft form back an abdomen に masato and す る is の 2 つ に branching し て い が る possibility in stopping さ れ た.

项目成果

Makino S., Masuya H., Ishijima J., Yada Y., Shiroishi T.: "A spontaneous mouse mutation, mesenchymal dysplasia (mes), is caused by a deletion of the most C-terminal cytoplasmic domain of patched (ptc)"Dev. Biol.. 239(1). 95-106 (2001)

Makino S.、Masuya H.、Ishijima J.、Yada Y.、Shiroishi T.：“自发的小鼠突变，间充质发育不良 (mes)，是由 patched (ptc) 最 C 端胞质结构域的缺失引起的

Kikkawa, Y., Miura, I., Takahama, S., Wakana, S., Yamazaki, Y., Moriwaki, K., Shiroishi, T., Yonekawa H.: "Microsatellite Database for MSM/Ms and JF1/Ms, molossinusu-derived strains"Mammal. Genome. 12. 750-752 (2001)

Kikkawa, Y.、Miura, I.、Takahama, S.、Wakana, S.、Yamazaki, Y.、Moriwaki, K.、Shiroishi, T.、Yonekawa H.：“MSM/Ms 和 JF1/Ms 的微卫星数据库