形態を制御する細胞内骨格制御系の網羅的解析

全面解析控制形态的细胞内骨骼控制系统

• 批准号: 13202044
• 负责人: 天野 睦紀
• 金额: $ 3.84万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13202044/
• 关键词: GEX-2; GEX-3; 細胞骨格; veast two-hybrid; RNAi; 形態形成

多細胞生物における組織形態形成や神経発生を理解するためには、細胞の形態変化や移動に伴う細胞骨格の制御機構を解析することが重要である。線虫などのモデル生物におけるゲノム解析の進展により、これまで困難であった、多重に存在する細胞骨格分子や制御分子の網羅的な解析が可能となってきた。本研究では、線虫及び培養細胞を用いて細胞骨格及び細胞骨格制御分子による細胞・組織の形態制御機構や神経発生機構を包括的に理解することを目的としている。本研究において申請者は、線虫においてyeast two-hybrid法とRNAi法を組み合わせた機能的スクリーニング法を開発した。この方法を用いて、線虫の組織形態形成に関与する遺伝子[GEX2,GEX3,W07B3.2(GEI-4)]について組織的に結合分子探索、及び遺伝子破壊実験を行った。現在までに、多数の結合分子を同定し、この中からさらに遺伝子破壊により形態形成に異常が認められる分子を少なくとも6種同定した。さらに、組織特異的プロモーター(lin-26p, myo-3p)を用いたRNAi非感受性株の組織特異的RNAi感受性回復株を樹立した。GFPを指標にこれらの株の評価を行ったところ、RNAi感受性を回復させた組織において特異的に遺伝子破壊が起こっていることを確認し、組織特異的RNAiが可能であることを示した。以上の方法を組み合わせることにより、システマティックに組織形態形成に関わる遺伝子群を同定・解析することが出来ると考えられる。

The tissue structure of multicellular organisms is formed. People understand how to move cells in the form of cells, and the control mechanism of cell bone cells is used to analyze the important problems of the cells. The analysis of worms, biological agents, and molecular networks that control the network may affect the performance of the network. In this study, oysters, beetles and culture cells were used to control the molecular tissue structure, the structure of the body, the body of the body, and the body of the body. In this study, applicants and worms were tested by the yeast two-hybrid method. The RNAi method was used to conduct a comprehensive evaluation of the mechanism. In this method, we use the molecular exploration of the combination of the tissue configuration of the worm, the worm and the GEX2,GEX3,W07B3.2 (GEI-4), the molecular exploration of the tissue, and the molecular exploration of the tissue. At present, there are six kinds of homographies, which are the same as that of most normal molecules, most of which are the same as that of most of the molecules, and that of most of the molecules are the same as that of most of the molecules. Lin-26p (myo-3p) of tissue-specific and tissue-specific isolates were isolated using RNAi-receptive response strains specific to tissue-specific RNAi non-receptive strains. GFP indicates that the RNAi of the organization may be confirmed, and the RNAi of the organization may be displayed. The above methods are combined to form the configuration of the system. The sub-group of the system is the same as that of the subgroup.

项目成果

Araki, S. et al.: "Arachidonic acid-induced Ca2+ sensitization of smooth muscle contraction through activation of Rho-kinase"Pflugers Arch. 441・5. 596-603 (2001)

Araki, S. 等：“花生四烯酸通过 Rho 激酶的激活诱导平滑肌收缩的 Ca2+ 敏化”Pflugers Arch. 441·5 (2001)。

Fukata, Y.et al.: "Rho-Rho-kinase pathway in smooth muscle contraction and cytoskeletal reorganization of non-muscle cells"Trends Pharmacol Sci. 22・1. 32-39 (2001)

Fukata, Y. 等：“平滑肌收缩和非肌肉细胞的细胞骨架重组中的 Rho-Rho 激酶途径”Trends Pharmacol Sci. 22・1 (2001)。

Katoh, K.et al.: "Stress fiber organization regulated by MLCK and Ryo-kinase in cultured human fibroblasts"J Physiol Cell Physiol. 280・6. C1669-C1679 (2001)

Katoh, K.等：“培养的人成纤维细胞中MLCK和Ryo激酶调节的应力纤维组织”J Physiol Cell Physiol. 280·6 (2001)。

Inagaki, N.et al.: "CRMP-2 induces axons in cultured hippocampal neurons"Nat Neurosci. 4・8. 781-782 (2001)

Inagaki, N. 等人：“CRMP-2 在培养的海马神经元中诱导轴突”Nat Neurosci 4·8 (2001)。

Katoh, K.et al.: "Rho-kinase-mediated contraction of isolated stress fibers"J Cell Biol. 153・3. 569-584 (2001)

Katoh，K.等人：“Rho激酶介导的分离应力纤维的收缩”J Cell Biol.153·3（2001）。