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プロテインフラックスと遺伝子発現の協同的制御による細胞構築原理の解明

通过协同控制蛋白质通量和基因表达阐明细胞构建原理

基本信息

批准号：
13206042
负责人：
中井正人
金额：
$ 3.71万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

植物体は葉や根、花など分化した器官・組織を形成し、さらにそれぞれの機能を維持するために空間的にも時間的にも特有の蛋白質セットを合成して細胞内外に配置している。このような蛋白質の配置をプロテインフラックスとして捉えることができる。本研究では特に植物の様々な代謝活動に必須なプラスチドへのプロテインフラックスを題材として、様々な外環境の変化に応じて異なった輸送制御を受けるプラスチドの蛋白質群の網羅的な解析、(ii)プラスチドへのプロテインフラックスのリアルタイム解析:プラスチドへのプロテインフラックスを組織・器官・個体レベルで理解するため、プラスチドへの蛋白質輸送を可視化した植物体を用いたリアルタイムの解析を進めている。まず、トウモロコシの緑葉から単離したmRNAをもとにin vitro蛋白質合成を行い、bulkの翻訳産物によるトウモロコシ葉緑体へのin vitro輸送実験をおこなった。輸送実験後、トリプシン処理による未輸送蛋白質の除去を行った後、葉緑体をさらに分画し、葉緑体へ輸送されたと思われる蛋白質のバンドを複数種類検出することができた。(2)トウモロコシチラコイド膜への蛋白質のターゲティングに関与するcpFtsYのMuトランスポゾン変異株を単離することに成功した。この変異株ではチラコイド蛋白質のみならず葉緑体内の様々な蛋白質の存在量が変化していることが、一次元の電気泳動で確認された。(3)Dexを誘導物質として発現を誘導できるプロモーター支配下に、葉緑体ストロマに局在する蛋白質およびチラコイドに局在する蛋白質とGFPとの融合蛋白質の遺伝子を導入し、形質転換植物を作製した。現在、各10ラインについてT_2種子を得ることができた。

The plant body is divided into leaves, roots, flowers, organs and tissues, and the function of the plant body is maintained. The protein synthesis is unique to the cell and is arranged in the cell. This is the first time I've ever seen a protein. This study aims to analyze the protein network of plants that are essential for metabolic activities,(ii) analyze the protein network of plants that are essential for metabolic activities,(iii) analyze the protein network of plants that are essential for metabolic activities,(iv) analyze the protein network of plants that are essential for metabolic activities,(v) understand the protein network of plants In vitro protein synthesis, in bulk, in chloroplast, in vitro protein transport, in vitro protein synthesis, in vitro protein transport, in vitro protein transport, in vitro protein transport in vitro. After transportation, after removal of untransported proteins, after chloroplast separation, after chloroplast transportation, after removal of untransported proteins, after chloroplast separation, after chloroplast removal, after chloroplast removal. (2)The protein content of the protein in the membrane of the plant was successfully isolated from the plant. The amount of protein present in chloroplasts of these plants was determined by the electrical activity of primary elements. (3)Dex induction substance and expression induction under control of chloroplast, protein and GFP fusion protein gene introduction, morphological change plant production. Now, each of the 10 seeds of the T_2 seed has been obtained.