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植物プラスチドにおける蛋白質輸送の分子メカニズムの解析

植物质体中蛋白质转运的分子机制分析

基本信息

批准号：
15032229
负责人：
中井正人
金额：
$ 5.38万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

クロロプラスト(葉緑体)に代表される植物のプラスチド(色素体)は、光合成機能だけでなく、窒素や硫黄の同化、また脂質、アミノ酸の生合成といった植物に不可欠の様々な代謝機能を担うオルガネラである。これら分化したプラスチドの機能は、それぞれのプラスチドに特徴的な蛋白質組成を維持・制御することで成り立っている。植物プラスチドを構成する蛋白質の多くは核ゲノムにコードされており、前駆体として細胞質ゾルで合成された後、プラスチドへと輸送される。この輸送にはプラスチド包膜に存在する蛋白質輸送装置やそれと協同的に働くプラスチド内外の分子シャペロン蛋白質が関与している。本年度の研究では、さまざまな植物のプラスチドにおいて蛋白質輸送装置の構成コンポーネントの組成およびアセンブリーの状態をBlue-Native電気泳動・ウエスタン解析、免疫沈降、化学架橋などの手法を用いて比較解析を進めた。また、in vitro合成したプラスチド蛋白質前駆体と単離プラスチドを用いた蛋白質輸送系において、前駆体と蛋白質輸送装置や分子シャペロンとの相互作用を調べた。これまでの解析から、われわれは、プラスチド外包膜に存在する蛋白質膜透過装置Tocが800kD~1000kDの超分子複合体として存在していること、構成要素の存在比、そのコアとなる因子について明らかにしてきた。さらに最近、前駆体の輸送中間体を用いた解析により、前駆体がTocを通過した後に相互作用していると考えられる超分子複合体の検出に成功した。

Chloroplast (chloroplast) represents the photosynthetic function of plants, including sulfur assimilation, lipid synthesis, and acid synthesis. Chloroplast (chloroplast) represents the metabolic function of plants. The protein composition of these different species is maintained and controlled. Plant protein composition is mainly composed of nuclear, precursor, cytoplasmic, and transport proteins. The protein delivery system is composed of two parts: one part is the membrane, the other part is the membrane. This year's research is focused on the comparative analysis of Blue-Native electrophoresis, immunosedimentation, and chemical bridging techniques for protein delivery devices in plants. In vitro synthesis, protein precursors, protein delivery systems, protein delivery devices, and molecular interactions are regulated. The analysis results show that there is a protein membrane permeation device Toc 800kD~1000kD supramolecular complex, and the existence ratio of constituent elements. Recently, the precursor and the transport intermediate were analyzed and the supramolecular complex was successfully detected.