複製開始因子ORC1と細胞周期制御とのクロストーク異常と細胞のがん化

复制起始因子 ORC1 与细胞周期控制和细胞癌变之间的异常串扰

• 批准号: 13216074
• 负责人: 小布施 力史
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Nara Institute of Science and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13216074/
• 关键词: ORC; 発現制御; 染色体; 細胞周期; 複合体; 癌; 複製; チェックポイント

ヒト細胞において、G1/S期に特異的なORC1の発現によるORC複合体の形成と染色体複製、細胞増殖と間に密接な関係があるという以下の知見を得た。(1)ヒトORC1は増殖中の細胞のG1後期からS初期にかけて発現し、クロマチンと核構造の両方に相互作用すること、ORC1のS期の分解にプロテアソーム分解系が関与していることを明らかにした。(2)ORC2,-3,-4,-5からなる複合体(ORC2-5複合体)は細胞周期をとおして存在し、G1/S期にORC1が発現するとORC1,-2,-3,-4,-5からなるORC1-5複合体が形成されることを明らかにした。(3)ORC2-5複合体は、細胞周期をとおしてクロマチンと相互作用すること、ORC1との複合体形成によりG1/S期に一過的に特殊な核内の構造と相互作用することを明らかにした。(4)G1/S期におけるORC1-5複合体の形成が、複製ヘリケースであるMCMのクロマチンおよび核構造へのローディングに関与することを明らかにした。本年度の助成により、ORC複合体とそれを基点とする複製因子の集合、ひいてはクロマチン・核構造との相互作用のダイナミクスと、細胞周期制御とのクロストークの一端がを明らかになった。その意味で、この複製複合体の特性の変動がチェックポイント、細胞分化に異常を引き起こすというシナリオに歩近づけたものと考えている。現在、実際のがん組織におけるORCの発現、制御の検討を共同研究として始めており、細胞の異常増殖におけるORCの関与が明らかになるものと思われる。さらに、LC/MS/MSによる微量蛋白質同定技術を安定して運用できるまで確立したので、ORCサブユニットと相互作用する因子の同定、解析を行うことにより、複製開始因子ORCが基点となる細胞周期およびチェックポイント機構のネットワークを構成する分子の実体が明らかとなり、そのクロストーク異常として細胞のがん化を捉えることが可能となると思われる。

The following observations were made on the formation of ORC complexes and the close relationship between chromosome replication and cell proliferation in the G1/S phase. (1)ORC1 is involved in the development of nuclear structural interactions in cells from late G1 to early G2. (2) ORC2,-3,-4,-5 complex (ORC2 -5 complex) exists in cell cycle, ORC1 appears in G1/S phase, ORC1,-2,-3,-4,-5 complex forms in cell cycle. (3) ORC2 -5 complex is formed in the G1/S phase of the cell cycle. (4)G1 The formation and replication of ORC1-5 complex in the nuclear structure of MCM This year's contribution to the formation of ORC complexes is based on the collection of replication factors, the interaction of nuclear structures, and cell cycle control. This means that the characteristics of the replicative complex are changed, and cell differentiation is abnormal. Now, in the real world, the discovery of ORC and the review of its control are under joint research, and the relationship between ORC and abnormal cell proliferation is unclear. LC/MS/MS microprotein identification technique is used to determine the identity of ORC interaction factors and to analyze ORC replication initiation factors. It's not unusual for cells to change.

项目成果

Tadokoro R, Fujita M, Miura H, Shirahige K, Yoshikawa H, Tsurimoto T, Obuse C: "Scheduled conversion of replication complex architecture at replication origins of S. cerevisiae during the cell cycle"J Biol Chem.. (In Press). (2002)

Tadokoro R、Fujita M、Miura H、Shirahige K、Yoshikawa H、Tsurimoto T、Obuse C：“细胞周期期间酿酒酵母复制起点复制复合体结构的预定转换”J Biol Chem..（正在出版）。

Shikata, K., Ohta, S., Yamada, K., Obuse, C., Yoshikawa, H., Tsurimoto, T.: "The Human Homologue of Fission Yeast cdc27, p66, Is a Component of Active Human DNA Polymerase δ"J.Biochem.. 129. 699-708 (2002)

Shikata, K.、Ohta, S.、Yamada, K.、Obuse, C.、Yoshikawa, H.、Tsurimoto, T.：“裂变酵母 cdc27、p66 的人类同源物是活性人类 DNA 聚合酶 δ 的一个组成部分“生物化学杂志.. 129. 699-708 (2002)