複製開始因子ORC1と細胞周期制御とのクロストーク異常と細胞のがん化

复制起始因子 ORC1 与细胞周期控制和细胞癌变之间的异常串扰

• 批准号: 13216074
• 负责人: 小布施 力史
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Nara Institute of Science and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13216074/
• 关键词: ORC; 発現制御; 染色体; 細胞周期; 複合体; 癌; 複製; チェックポイント

ヒト細胞において、G1/S期に特異的なORC1の発現によるORC複合体の形成と染色体複製、細胞増殖と間に密接な関係があるという以下の知見を得た。(1)ヒトORC1は増殖中の細胞のG1後期からS初期にかけて発現し、クロマチンと核構造の両方に相互作用すること、ORC1のS期の分解にプロテアソーム分解系が関与していることを明らかにした。(2)ORC2,-3,-4,-5からなる複合体(ORC2-5複合体)は細胞周期をとおして存在し、G1/S期にORC1が発現するとORC1,-2,-3,-4,-5からなるORC1-5複合体が形成されることを明らかにした。(3)ORC2-5複合体は、細胞周期をとおしてクロマチンと相互作用すること、ORC1との複合体形成によりG1/S期に一過的に特殊な核内の構造と相互作用することを明らかにした。(4)G1/S期におけるORC1-5複合体の形成が、複製ヘリケースであるMCMのクロマチンおよび核構造へのローディングに関与することを明らかにした。本年度の助成により、ORC複合体とそれを基点とする複製因子の集合、ひいてはクロマチン・核構造との相互作用のダイナミクスと、細胞周期制御とのクロストークの一端がを明らかになった。その意味で、この複製複合体の特性の変動がチェックポイント、細胞分化に異常を引き起こすというシナリオに歩近づけたものと考えている。現在、実際のがん組織におけるORCの発現、制御の検討を共同研究として始めており、細胞の異常増殖におけるORCの関与が明らかになるものと思われる。さらに、LC/MS/MSによる微量蛋白質同定技術を安定して運用できるまで確立したので、ORCサブユニットと相互作用する因子の同定、解析を行うことにより、複製開始因子ORCが基点となる細胞周期およびチェックポイント機構のネットワークを構成する分子の実体が明らかとなり、そのクロストーク異常として細胞のがん化を捉えることが可能となると思われる。

我们已经获得了以下发现，即通过表达ORC1在G1/S相的表达，人类细胞中的染色体复制和细胞增殖之间存在密切的关系。 （1）我们已经透露，在增殖细胞中，人类ORC1从G1晚期到早期表达，与染色质和核结构相互作用，并且蛋白酶体降解系统参与S期ORC1的降解。 （2）揭示了由ORC2，-3，-4，-5（ORC2-5复合物）组成的复合物在整个细胞周期中都存在，并且在G1/S相表达ORC1时，形成了由ORC1，-2，-2，-3，-4，-5组成的ORC1-5复合物。 （3）我们已经揭示了ORC2-5复合物通过细胞周期与染色质相互作用，并且与ORC1的复合物在G1/S相期间与特殊的核结构瞬时相互作用。 （4）我们已经透露，G1/S相期间ORC1-5复合物的形成参与将复制解旋酶MCM加载到染色质和核结构中。今年的赠款揭示了ORC复合物及其基础复制因子之间的相互作用的动态，因此染色质 - 核结构以及细胞周期控制之间的串扰。从这个意义上讲，我们认为这种复制络合物的特征的变化使我们更接近了一种检查点和细胞分化异常的情况。当前，我们正在开始对实际癌症组织中兽人的表达和调节的联合研究，并且很可能会发现ORC参与细胞异常增殖。此外，由于已经建立了LC/MS/MS，因此可以稳定运行痕量蛋白识别技术，因此人们认为，通过识别和分析与ORC亚基相互作用的因素，即组成细胞周期和检查点机制的网络的分子的实质，其中复制性启动因子ORC可能会捕捉到一个癌症，并且可以捕获癌症。