Infektion von Mäusen mit murinem Gammaherpesvirus-68(MHV-68) als Tiermodell zur Untersuchung der Rolle einzelner Gammaherpesvirus-Gene

以鼠伽马疱疹病毒 68 (MHV-68) 感染小鼠为动物模型，研究个体伽马疱疹病毒基因的作用

• 批准号: 5314348
• 负责人: Professor Dr. Heiko Adler
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Pharmakologie und Toxikologie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2000-12-31 至 2008-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5314348?language=en
• 关键词: Infektion; von; usen; mit; murinem

Erkrankungen, die durch humane Gammaherpesviren verursacht werden, sind besonders in immunsupprimierten Patienten von großer Relevanz. Die Kenntnisse zur Pathogenese sowie zur Funktion viraler Proteine im Verlauf dieser Erkrankungen sind begrenzt, u.a. durch den Mangel an geeigneten Tiermodellen. Das murine Gammaherpesvirus-68(MHV-68) ist ein natürliches Pathogen für Mäuse. Auf Grund seiner großen Ähnlichkeit zu EBV und HHV-8 hat es in jüngster Zeit große Aufmerksamkeit als Tiermodell zum Studium humaner Gammaherpesvirus-Infektionen auf sich gezogen. Während die Immunantwort gegen MHV-68 bereits bearbeitet wird, gibt es nur wenige Untersuchungen zur Funktion einzelner viraler Proteine. In unseren Vorarbeiten haben wir das gesamte MHV-68 Genom als Bacterial Artificial Chromosome (BAC) kloniert und unter Anwendung dieses Systems eine effiziente Mutagenesemethode etabliert, mit der das MHV-68 Genom in E. coli beliebig verändert werden kann. Zu untersuchende Gene können gezielt deletiert oder mutiert werden, darüberhinaus können Gene zusätzlich inseriert oder ausgetauscht werden. Die Auswirkung dieser Veränderungen auf die Infektion von Zellen in vitro sowie die Infektion von Mäusen in vivo wird Aufschluss über die Funktion der entsprechenden Gene geben. In dem vorliegenden Projekt sollen folgende Untersuchungen durchgeführt werden: I) Untersuchung der Rolle des K12-Locus von HHV-8 in vivo im Kontext der MHV-68 Infektion II) Untersuchung der Rolle des offenen Leserahmens (ORF) 74 von HHV-8 in vivo im Kontext der MHV-68 Infektion III) Untersuchung der Rolle des 40 bp internen Repeats von MHV-68 für die in vivo MHV-68 Infektion. Das MHV-68 Modell erlaubt erstmals die Untersuchung einzelner Gammaherpesvirus-kodierter Proteine in vivo im Kontext der viralen Infektion in einem einfach zu handhabenden Tiermodell. Durch die in diesem System mögliche Kombination der Mausknockout-Technologie mit der Virus-BAC-Technologie werden Resultate erwartet, welche wesentlich zur Aufklärung der Bedeutung viraler Proteine für die Entstehung und den Verlauf von Gammaherpesvirus-Infektionen beitragen sollten.

因此，通过人道的伽马疱疹病毒治疗韦尔登，是大相关性免疫抑制患者的最佳选择。在美国，人们开始研究蛋白质在癌症中的致病作用。通过机器人制造出的模型。鼠γ疱疹病毒-68（MHV-68）是一种常见的Mäuse病原体。在EBV和HHV-8的研究中，我们发现了一种新的感染人类γ疱疹病毒的病毒模型。MHV-68的免疫原性是可以接受的，它只是一种病毒蛋白的功能检测。我们将MHV-68基因组克隆到细菌人工染色体（BAC）上，并在此系统下建立了一种有效的诱变方法，即用MHV-68基因组在大肠杆菌中进行诱变。coli beliebig verändert韦尔登Zu untersuchende Gene können gezielt deletiert or der mutiert韦尔登，darüberhinaus können Gene zusätzlich inseriert or der ausgetauscht韦尔登.通过体外感染Zellen的辅助检测，体内感染Mäusen的辅助检测可提高外源基因的功能。本研究通过韦尔登方法进行了以下研究：I）在MHV-68感染的体内对照中，HHV-8的K12位点的作用; II）在MHV-68感染的体内对照中，HHV-8的致病基因ORF 74的作用; III）在MHV-68感染的体内对照中，MHV-68的40 bp内部重复序列的作用。MHV-68模型在体内用于γ疱疹病毒感染的实验研究。在将Mausknockout-Technologie与病毒-BAC-Technologie韦尔登技术相结合的系统中，我们可以获得用于增强γ-疱疹病毒感染的病毒蛋白质。