低出力レーザー照射後の細胞内シグナル伝達系の動態解析

低功率激光照射后细胞内信号转导系统的动态分析

• 批准号: 13771079
• 负责人: 土肥 宏樹
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Ohu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13771079/
• 关键词: 低出力レーザー; 歯肉上皮細胞; PKC; in vitro; MAP kinase; tyrosine kinase; serine; threonine kinase; Jun kinase; 上皮細胞; 創傷治癒; 歯肉上皮

歯科臨床においては,口腔粘膜の創傷部に低出力レーザーを照射することで,治癒が促進されると報告されている。しかしながら,その作用機序について,未だ十分に解明されてはいない。そこで本研究では,細胞内シグナル伝達で重要な役割を担う各種protein kinaseに着目し,低出力レーザーの上皮細胞におよぼす効果について検討を行った。培養歯肉上皮細胞に,He-Neレーザー(タカラベルモント社,ベルビーム)と,半導体レーザー(ヨシダ社,トリンプルD)を各種条件で照射後,細胞増殖能を比較検討した。半導体レーザーでは20秒照射で最も細胞増殖が促進され,He-Neレーザーにおいても,同様の傾向が得られた。しかし,He-Neレーザーにおいては,60秒間以上照射すると細胞増殖が抑制される。そこで,細胞への為害作用が少なく,且つ,生物活性を高める半導体レーザーを使用し,以下の実験を行った。至適照射条件下でレーザーを細胞に照射後,MAP kinaseとPKC (protein kinase C)について,[γ-^<32>P]ATPを用い測定した。その結果,MAP kinaseはレーザー照射10分後,一過性の活性上昇が生じた。一方,PKC活性は,レーザー照射30分後まで上昇し,その後高い活性状態が続いた。また,conventional PKCを共焦点レーザ顕微鏡にて観察すると,照射後,細胞膜上へPKCがtranslocationする像が確認された。同様に共焦点レーザ顕微鏡を用いtyrosine kinase活性をみると,照射15分後には,歯肉上皮細胞の細胞膜上に強い反応が確認された。さらに,serine kinase活性は,レーザー照射により核周囲の膜系構造物に強い陽性反応が認められ,threonine kinase活性は細胞膜上および核周囲に活性上昇が認められた。また,Jun kinase活性は,非照射群の細胞では細胞質に陽性反応が散在性に認められたが,レーザー照射により核周囲の膜系構造物に一致し,強い陽性反応が発現した。以上,歯肉上皮細胞の細胞内シグナル伝達系におよぼす低出力レーザーの効果は,細胞膜,あるいは核周囲に存在する膜系構造物における各種protein kinaseを活性化することが明らかとなった。

In the department of medicine, there is a low output of the oral mucous membrane, the oral mucosa is exposed to radiation, and the treatment promotes the report. The mechanism of action is not very clear, and the mechanism of action is not very clear. The results of this study show that the intracellular enzyme is very important for the monitoring of all kinds of protein kinase, and the low output is used to analyze the epithelial cell cycle. After irradiation under various conditions, such as cultured meat epithelial cells, He-Ne cells, and hemispheric cells, the colonization capacity of the cells was higher than that of the animals. The hemispheres were irradiated for 20 seconds to promote the proliferation of the cells, and the He-Ne cells were irradiated in the same way as in the same direction. After irradiation for more than 60 seconds, He-Ne cells were irradiated for more than 60 seconds. The harmful effect of cytopathic acid is less, and the biological activity is high. Hemispheres are not used. After irradiation, MAP kinase PKC (protein kinase C) cell, [γ-^ & lt;32>P] ATP was used to determine the temperature. The results showed that the sexual activity of MAP kinase was increased after 10 minutes of irradiation. On one side, the activity of PKC was increased after 30 minutes of exposure, and the active state was increased after exposure. After irradiation, PKC translocation on the cytomembrane appeared to be confirmed by conventional PKC. After 15 minutes of irradiation, the tyrosine kinase activity was detected on the cell membrane of the meat epithelium. Serine kinase activity, threonine kinase activity, perinuclear membrane system, threonine kinase activity, perinuclear activity. Radiation, Jun kinase activity, non-irradiation group, cell, scattered, radiation, perinucleus, membrane, creature, and strong sex. Above, the meat epithelia, the intracellular yeast, the low-output fruit, the cell membrane, and the nuclear periphery of the meat epithelia. There are all kinds of protein kinase activation products in the cell membrane system and in the periphery.

项目成果

土肥宏樹: "ヒト歯肉上皮細胞に対する低出力レーザーの作用機序"奥羽大学歯学誌. 28・2. 105-117 (2001)

土井弘树：“低功率激光对人牙龈上皮细胞的作用机制”，奥大学牙科杂志 28・2（2001）。

土肥宏樹, 齋藤勇, 月田秀夫 他: "培養ヒト線維芽細胞のactin filamentおよびfibronectinにおよぼす低出力レーザーの影響"日本レーザー歯学会誌. 13・2. 72-78 (2002)

Hiroki Doi、Isamu Saito、Hideo Tsukita 等：“低功率激光对培养的人成纤维细胞中肌动蛋白丝和纤连蛋白的影响”日本激光牙科学会杂志 13・2（2002 年）。